Key points are not available for this paper at this time.
الملخص: تعتبر أنظمة CRISPR–Cas من النوع III-A (Csm) إنزيمات بروكارية متعددة الوحدات وأبعاد متعددة تحمي العوائل من الغزاة الفيروسي. بالإضافة إلى قطع رنا المنشطة، يوفر Csm نشاطين إضافيين: تمزيق الحمض النووي أحادي السلسلة وتصنيع أوليغوادينيلات حلقية (cOAs) بواسطة وحدة Cas10. تظهر إنزيمات Cas10 المعروفة تنوعاً مدهشاً في إنتاج cOA. تم التعرف على ثلاثة أشكال رئيسية—cA3 و cA4 و cA6، كل منها لديه القدرة على تحفيز تأثيرات downstream فريدة. بينما تم توضيح آلية التنشيط المعتمد على cOA بشكل جيد، فإن الأساس الجزيئي لتصنيع أشكال cOA المختلفة لا يزال غير واضح. هنا، نقدم توصيفاً هيكلياً لمجمع Csm المنتج لـ cA6 أثناء تنشيطه بواسطة رنا نشط. تشير تحليل الوسائط التي تم التقاطها أثناء تصنيع cA6 إلى عملية نقل نوكليوتيد من 5′ إلى 3′. يمكن تحديد ثلاثة مواقع رئيسية مرتبطة بالأدينين على طول مسار إطالة السلسلة، بما في ذلك ثنائي تييروسين–ثريونين فريد يُوجد فقط في Cas10 المنتج لـ cA6. بشكل متناسق، أدى تعطيل ثنائي التييروسين–ثريونين إلى تدهور إنتاج cA6 بشكل محدد بينما عزز إنتاج cA4. تشير هذه النتائج إلى أن Cas10 يستخدم آلية إنزيمية فريدة لتشكيل الرابطة الفوسفاتية وقد تطورت استراتيجيات مميزة لتنظيم طول سلسلة cOA.
درس غوسوامي وآخرون (الخميس) هذا السؤال.