التوصيف قبل السريري لمثبط انتقائي جديد لمتحور JAK2 V617F يوفر نوعًا عاديًا من نوعه.

خلفية: متحور JAK2 V617F هو أكثر الشذوذات الجزيئية شيوعًا في الأورام النقوية التي لا تحمل جين BCR-ABL، حيث يحدث في حوالي 95% من مرضى كثرة الكريات الحمراء الحقيقية، و50% من مرضى التخثر الأساسي أو التليف النقوي الأولي. يمثل هذا المتحور المكتسب في نطاق الكيناز الكاذب JAK2 (JH2) تنشيطًا مستمرًا لإشارات كيناز JAK2، مما يؤدي إلى نمو خلايا الدم الحمراء المستقل عن السيتوكينات. مثبطات JAK2 المعتمدة سريريًا، مثل الركسوليتينيب، هي ملصقات لنطاق الكيناز (JH1) تعمل بفاعلية على تخفيف الأعراض وتحسين النتائج لدى المرضى الذين يعانون من الأورام النقوية. ومع ذلك، حتى مع العلاج طويل الأمد، نادرًا ما يؤدي هذا العلاج إلى تقليل ملحوظ في تكرار الأليل المتغير (VAF) أو في الشفاء الجزيئي، لأن تأثيره مقيد بالتسممات الدموية. يمتلك مثبط JAK2 V617F الانتقائي الذي يوفر JAK2 العادي القدرة على استهداف وإزالة خلايا الطفرات بشكل انتقائي وتحفيز الشفاء الجزيئي، مع تجنب مشكلات التحمل الدموية. هنا، نقدم التوصيف قبل السريري لـ CGT1145، وهو مثبط انتقائي لطفرات JAK2 V617F JH2، ويظهر قوة وصفة متميزة ضد JAK2 العادي. الطرق / النتائج: تم التنقل من خلال التفاعل فرط الانتقائية للترتيب الرئيسي (بما في ذلك CGT1145) مع قياسات شدة ارتباط JAK2 JH2 وJAK2 JH1. أظهر اختبار ارتباط تنافسي مخصص باستخدام نطاقات JH1 وJH2 المنقاه ومواد توضيحية مخصصة، ارتباطًا تفضيليًا إلى مجال JH2 (6300 نانومتر JH1 / 0.3 نانومتر JH2، انتقائية بمقدار 21000 مرة). تم قياس النشاط الخلوي باستخدام قراءات phospho-STAT5 من خلال HTRF في خلايا TF-1 لسرطان الدم البشري (JAK2 العادي) وخلايا HEL 92.1.7 لسرطان الدم البشري (هُناك جين جينين متجانسين لمتحور JAK2 V617F). تشير البيانات التي تم إنشاؤها عبر سلسلة القيادة إلى قوة وصفة متميزة مع IC50s خلوية لـ JAK2 V617F تبلغ 100 نانومتر وانتقائية تبلغ 50 مرة عن JAK2 العادي. المركب القيادي، CGT1145، له IC50 يبلغ 91 نانومتر في اختبار الخلية قليل الحركة لمتحور JAK2 V617F وهو انتقائي بمقدار 89 مرة عن JAK2 العادي. يظهر هذا المركب انتقائية جيدة لنظام الكيناز مع توافر حيوي فموي قابل للتقدم عبر الأنواع. تم دراسة تفاعل الهدف في الجسم الحي باستخدام فئران عارية تحت الجلد مزروعة بخلايا HEL 92.1.7. عند النقطة الزمنية 4 ساعات، أظهر CGT1145 تثبيطًا قويًا يعتمد على الجرعة لمستوى phospho-STAT5 في الورم عبر AlphaLISA عند مستويات جرعة منخفضة. في نموذج الفأر للمرض البشري، تم زراعة الفئران العارية تحت الجلد عن طريق الوريد بخلايا Ba/F3-EPOR-JAK2V617F. أظهر العلاج بـ CGT1145 تثبيطًا يعتمد على الجرعة لتضخم الطحال يعادل للركسوليتينيب. بالإضافة إلى ذلك، تم تحمل CGT1145 جيدًا طوال فترة الدراسة. الاستنتاجات: يُعد CGT1145 مثبط JAK2 الانتقائي الذي يحافظ على JAK2 العادي والمتحور JAK2 V617F والذي يمكن أن يقدم تفاعلًا أكبر للهدف بشكل ملحوظ، مما قد يؤدي إلى تحسين القدرة على القضاء على خلايا MPN التي تحمل JAK2 V617F وتحفيز الشفاء الجزيئي مع تجنب مشكلات التحمل الدموية. لا تزال الدراسات جارية لتقييم CGT1145، بالإضافة إلى نظائر متقدمة أخرى في سلسلة القيادة لدينا.