تطوير نموذج فأر إنساني مستند إلى NOG-W41 لدراسة التكون الدموي البشري في الجسم الحي

الملخص تعتبر نماذج الفئران البشرية المزروعة بخلايا جذعية دموية بشرية CD34⁺ أدوات أساسية لدراسة التكون الدموي البشري، وتطوير خلايا المناعة، وتقييم فاعلية وأمان الأدوية في الجسم الحي. ومع ذلك، كانت النماذج السابقة مثل فئران NOG وNSG وBRG غالبًا ما تحد من كفاءة الزراعة، وضعف التمايز، والحاجة إلى التحضير المسبق مثل الإشعاع. للتغلب على هذه القيود، قمنا بتطوير نموذج فأر إنساني من الجيل التالي استنادًا إلى سلالة NOG-W41، التي تحمل طفرة في نطاق كيناز التيروزين لمستقبل c-Kit. تعزز هذه الطفرة زراعة الخلايا الطينية البشرية دون الحاجة إلى تحضير مسبق وتسمح بالصيانة طويلة الأمد لخلايا HSC في نخاع العظم. باستخدام سلالة NOG-W41، أنشأنا عدة سلالات introducing تعديلات جينية إضافية لدعم تطوير خطوط خلايا الدم البشرية المحددة. تمكّن فئران NOG-W41-hIL-3/hGM-CSF Tg (NOGW-EXL) وفئران NOGW-EXL hIL-5 Tg من تعزيز تمايز خلايا الدم البيضاء البشرية مثل الخلايا الوحيدة/macrophages، والخلايا البدينية، والحمضات. أظهرت فئران NOGW-EXL غير المعرضة للإشعاع مستويات زراعة أعلى بشكل ملحوظ من خلايا الدم البشرية CD45+ وخلايا سلالة المايلويد، خصوصاً الخلايا الحبيبية والصفائح الدموية/الماكروكريات، مقارنةً بفئران NOGW غير المعرضة للإشعاع أو NOG-EXL المعرضة للإشعاع بعد زراعة خلايا CD34⁺ البشرية. علاوة على ذلك، قمنا بإنشاء فئران NOGW-Mpl KO (NOGWM) حيث تم استنفاد الجين Mpl الفأري، الذي يشفر مستقبل الثrombopoietin. دعمت هذه الفئران مستويات عالية من إنتاج الصفائح الدموية البشرية، أكثر من 50٪ من الصفائح الدموية الدائرة في الدم المحيطي، حتى عندما تم زراعة عدد نسبي صغير من خلايا CD34⁺. بشكل عام، تمثل الفئران البشرية المستندة إلى NOG-W41 منصة قوية ومتنوعة لدراسات التكون الدموي البشري في الجسم الحي. إن كفاءة زراعتها العالية، وقدرتها على دعم عدة خطوط دموية، وإجراءات الزراعة المبسطة تجعلها أدوات واعدة لكل من البحوث الأساسية والتطبيقات التحويلية، بما في ذلك نمذجة الأمراض، وتطوير العلاجات المناعية، واختبار الأدوية في أنظمة إنسانية.