ملخص: تُعتبر بروتينات BH3-only مثل EGL-1 المُحفّز الرئيسي لموت الخلايا خلال تطور D. elegans. يُعتقد أن بروتين EGL-1 يتم تصنيعه بشكل أساسي في الخلايا المبرمجة للموت ويتركز في الميتوكوندريا. استخدمنا تقنية تعديل CRISPR-Cas لتعديل موضع egl-1 لإضافة تسلسل الترميز للبروتين الفلوري أحادي الذرة StayGold أو 18 نسخة من الببتيد SunTag إلى الإطار المفتوح للقراءة الداخلي. وجدنا أن بروتين EGL-1 المُعلّم يتشارك الموقع مع الميتوكوندريا في vivo وأن الموقع الميتوكوندري يعتمد على بروتين CED-9 المناهض لموت الخلايا المبرمج من نوع BCL-2. يتوافق ذلك مع وجود mRNA من egl-1 في الخلايا المبرمجة للموت وكذلك خلاياها السلفية (‘الأم’). يُحدد بروتين EGL-1 في كلا النوعين من الخلايا في vivo. علاوة على ذلك، يكشف التصوير الزمني الحقيقي أن بروتين EGL-1 يختفي بسرعة من الخلية الأم قبل انقسامها وأن بروتين EGL-1 يظهر بسرعة مرة أخرى بشكل محدد في الخلية الابنة المبرمجة للموت. تُظهر نتائجنا الموقع الميتوكوندري المعتمد على CED-9 لبروتين EGL-1 BH3-only والتحكم الديناميكي في تخليق بروتين EGL-1 وتدهوره. بالإضافة إلى ذلك، حددنا مستويات تحكم إضافية لوظيفة egl-1 BH3-only التي توسع فهمنا لتفعيل موت الخلايا في vivo.
دراسة جيانغ وآخرون (الأربعاء) هذا السؤال.