ملخص: نالت الحويصلات خارج الخلوية (EVs) المنتجة من البكتيريا سالبة الجرام اهتمامًا علميًا متزايدًا في السنوات الأخيرة نظرًا لفهم أدوارها في مسببات الأمراض وإمكاناتها الحيوية. ومع ذلك، فإن عزل مثل هذه الجزيئات النانوية يمثل تحديًا تقنيًا. هنا، قمنا بتقييم بروتوكول سريع وقابل للتكرار لعزل EV من البكتيريا المزروعة على وسط صلب، مع تحليل الأنواع سالبة الجرام ضمن أجناس Acinetobacter و Aeromonas و Escherichia و Enterobacter و Klebsiella و Pseudomonas. بالإضافة إلى تجنب أحجام الثقافة الكبيرة، كانت الطريقة قابلة للتكرار وسريعة نسبيًا ومتوافقة مع تحليلات متعددة لاحقة، بما في ذلك تحليل تدفق الخلايا، وTEM، وNTA، بينما تم الحصول على ملفات لجزيئات نانوية محددة سلالات ذات نقاء مقبول. تظهر نتائجنا أيضًا أن سلالات Pseudomonas وAeromonas كانت أعلى وأدنى منتجي EV على التوالي. على الرغم من أن الطريقة غالبًا ما كانت تعزل الألياف معًا، إلا أنه تم الحصول على عزل نقي أيضًا. أظهرت المقارنة بين عزل EV من الخلايا المزروعة على وسط صلب مع تلك المزروعة في ثقافات سائلة أن النمو الصلب يعطي باستمرار المزيد من الجزيئات النانوية. تمثل الأساليب منهجًا قيمًا لعزل EV البكتيرية وقد تخدم كخطوة أولية مهمة في سير عمل بحوث EV.
دراسة Guardatti وآخرون (Sun) هذا السؤال.