Key points are not available for this paper at this time.
تعد التعبير الجيني الثابت في خلايا الثدييات شرطًا مسبقًا للعديد من التجارب المختبرية وفي الجسم الحي. ومع ذلك، فإن إدماج البلاسميدات في جينومات الثدييات أو استخدام أنظمة الفيروسات الراجعة/الفيروسات القهقرية له قيود ذاتية. إن استخدام العناصر القابلة للنقل، مثل نظام Sleeping Beauty (SB)، يتجاوز معظم هذه العيوب (مواقع الإدماج، قيود الحجم) ويسمح بالإنتاج السريع لخطوط خلايا ثابتة. تتم عملية الإدماج لـ SB بواسطة إنزيم ناقل، كما أن التعامل مع نظام نقل الجينات هذا سهل وسريع وآمن. هنا، نعرض تحسيناتنا التي أجريناها على نظام الناقل SB الموجود ونقدم نوعين جديدين من الناقلات للتعبير القوي المستمر أو المثير لأي جين من الجينات المستهدفة. كلا النوعين متاحين في 16 متغيرًا بعلامات اختيار مختلفة (بوميسين، هيغرومايسين، بلاستيسيدين، نيوميسين) وتعبير بروتين فلوري (GFP، RFP، BFP) لتلبية معظم المتطلبات التجريبية. مع هذا النظام، من الممكن بسرعة وموثوقية إنتاج خطوط خلايا من خلايا مُعدلة وراثيًا في بيئة تتسم بإنتاج متوسط (من ثلاثة إلى خمسة أيام). تعبر خطوط الخلايا بقوة عن أي جين مستهدف، سواءً بشكل مستمر أو بشكل منظم بشكل دقيق بواسطة دوكسيسيلين. وهذا يتيح للعديد من التجارب المعملية تسريع توليد البيانات بطريقة سريعة وموثوقة.
درس كوارز وآخرون (الأربعاء) هذا السؤال.