تحديد مثبطات DGAT2 باستخدام مطيافية الكتلة

تقدم مطيافية الكتلة مزايا كبيرة على تقنيات الكشف الأخرى في مجالات العثور على الأهداف، والتحقق من الأهداف، وتحسين المركبات الكيميائية الطبية. الميزة الواضحة الأولى هي القدرة على قياس تكوين المنتجات الإنزيمية مباشرة. بالإضافة إلى ذلك، فإن الحساسية الفطرية لأسلوب الكروماتوغرافيا السائلة/مطيافية الكتلة (LC/MS) تسمح بتنفيذ الاختبارات الإنزيمية عند تركيزات الركيزة عادة عند أو أقل من Km للركيزة. ميزة أخرى لأسلوب LC/MS هي القدرة على اختبار أنظمة الإنزيمات غير النقية التي سيكون من الصعب متابعتها بطرق التسمية التقليدية. تم استخدام هذا الأسلوب لتحديد مثبطات إنزيم دايكيلغليسيرول O-acyltransferase-2 (DGAT2)، وهو إنزيم عبر الغشاء يشارك في مسار إنتاج ثلاثي الغليسريد. تم استخدام أسلوب LC/MS بسبب نافذة الاختبار الموسعة (مقارنة بالأغشية الضابطة) التي تزيد عن سبعة أضعاف مقارنةً بأقل من مرتين مع اختبار الفلورة التقليدي. جعلت القدرة على إنتاج آلاف البيانات المعتمدة على الجرعة IC50 ممكنة بفضل استخدام نظام LC/MS متوازي ومتدرج بسرعة. من جهود فك الشيفرة، تم تحديد عدة سلاسل هيكلية مثبطة لنشاط DGAT2. بالإضافة إلى ذلك، ساعدت عملية تصنيف نوع كيميائي واحد بشكل خاص على تحديد مركبين واعدين عكسيين وانتقائيين (المركب 15 والمركب 16) اللذان يثبطان بشكل فعال إنتاج ثلاثي الغليسريد في خلايا كبدية أولية من الفأر.