المراقبة الفورية لبدء النسخ وإطالة سلسلة الجين في خميرة ذات أصل داخلي

تتحقق مستويات الرسول رنا الخلوي من خلال التعقيد التوافقي للعوامل التي تتحكم في النسخ، ومع ذلك فإن العدد القليل من الجزيئات المعنية في هذه المسارات يتقلب بشكل عشوائي. لم يكن من الممكن بعد ملاحظ التجربة نشاط بوليميراز فردي على جين داخلي لتوضيح كيفية حدوث هذه الأحداث في الكائن الحي. هنا، نصف طريقة تحليل التقلبات للـ RNA المتسم fluorescently لقياس ديناميات RNA الناشئ - بما في ذلك البدء، الإطالة، والإيقاف - في موقع خميرة نشط. نجد أنه لا يوجد ذاكرة نسخ بين أحداث البدء، وأن سرعة الإطالة يمكن أن تختلف بثلاثة أضعاف طوال دورة الخلية. من خلال قياس وفرة وحركة العامل النسخي upstream داخل النواة، نلاحظ أن معدل إطلاق الجين يتحدد مباشرة بواسطة أوقات بحث العامل المحفز.