تتوسط الكاسباسات موت الخلايا المبرمج المعتمد على 6-هيدروكسي دوبا أمين لكن لا تتسبب في النخر في خلايا PC12

السم العصبي 6-هيدروكسي دوبا أمين (6-OHDA) يسبب الموت المبرمج في خط خلايا الفيرموكوموسيتوم في الفئران PC12. الموت المبرمج المعتمد على 6-OHDA لا يمكن تمييزه من ناحية الشكل عن الموت المبرمج الناتج عن نقص المصل. تعرض خلايا PC12 لتركيز منخفض من 6-OHDA (25 ميكرومول) يؤدي إلى الموت المبرمج، بينما يؤدي التركيز المرتفع (50 ميكرومول) إلى مزيج من الموت المبرمج والنخر. قمنا بدراسة دور الكاسباسات في الموت المبرمج للخلايا PC12 الناتج عن 6-OHDA، باستخدام مثبط عام للكاسباسات، بنزيل أوكسي كربونيل-فال-ألا-أسب-فلوروميثيل كيتون (zVAD-fmk)، وقارنّا ذلك مع الموت المبرمج الناتج عن نقص المصل، المعروف بأنه يتضمن الكاسباسات. أظهرنا أن zVAD-fmk (100 ميكرومول) منع تمامًا الشكل المبرمج لمظهر تكثف الكروماتين الناتج عن التعرض لكل من 6-OHDA (25 و50 ميكرومول) أو نقص المصل. علاوة على ذلك، أظهرت مستخلصات الخلايا من الثقافات المعالجة بـ 6-OHDA انقسامًا لمادة تحت الطيف الفلوري للبروتيازات الشبيهة بالكاسباسة-3 (الكاسباسة-2، 3، و7)، أستيل-أسب-غلو-فال-أسب-أمينوميثيلكومارين، وكان ذلك مثبطًا بواسطة zVAD-fmk. ومع ذلك، على الرغم من أن zVAD-fmk استعاد إجمالي حيوية الخلايا إلى الخلايا التي تعاني من نقص المصل أو الخلايا المعرضة لـ 25 ميكرومول 6-OHDA، إلا أن المثبط لم يستعد حيوية الخلايا المعرضة لـ 50 ميكرومول 6-OHDA. هذه البيانات تظهر دور بروتياز شبيه بالكاسباسة-3 في الموت المبرمج الناتج عن 6-OHDA وأن مثبط الكاسباسة كافٍ لإنقاذ خلايا PC12 من المكون المبرمج لكن ليس المكون النخري من سُمية 6-OHDA العصبية.