Key points are not available for this paper at this time.
البوليميراز Poly(ADP-ribose)-1 (PARP-1) هو بروتين نووي متعدد الوحدات (المجالات A وB وC وD وE وF) يشارك في العديد من الأنشطة الخلوية الأساسية. يتم تحفيزه عن طريق الارتباط بـ DNA المنقوص، حيث يقوم PARP-1 بعملية البوليميرازية للبولي (ADP-ribosyl) لبروتينات المتقبلين وللنفسه باستخدام NAD(+) كركيزة. أشارت الدراسات المبكرة إلى أن المجال D من المحتمل أن يكون واجهة لتفاعل البروتينات بين PARP-1 وأهدافه، ويعد أيضًا المنطقة الرئيسية للتعديل الذاتي. ومع ذلك، فإن تحديد مواقع التعديل قد تعقد بسبب الطبيعة غير المتجانسة لبوليميراز البوليمر Poly(ADP-ribose). هنا، نبلغ عن استراتيجية لتحديد مواقع التعديل في المجال D باستخدام الطفرة PARP-1 E988Q، التي تقوم فقط بعملية mono(ADP-ribosyl)ation. أدى تحليل هضم التريبسين للمجال D المعدل متبوعاً بتحليل LC-MS/MS إلى تحديد ثلاثة مواقع ADP-ribosylation في المجال D (D387 وE488 وE491). تظهر بياناتنا أيضًا، على عكس التقارير المبكرة، أن التعديل الذاتي لـ PARP-1 ليس مقتصرًا على المجال D بل يحدث خارج هذه المنطقة. بالإضافة إلى ذلك، فإن المجال D ليس ضروريًا لنشاط PARP-1 حيث أن الطفرة PARP-1 التي تم حذف المجال D منها لا تزال نشطة كيميائيًا. تم أيضًا إثبات أن اثنين من الببتيدات الاصطناعية ذات تسلسلات الأحماض الأمينية المستمدة من مواقع ADP-ribosylation في المجال D تعمل كركائز لـ PARP-1. ستساعد المنهجية والنتائج المبلغ عنها هنا في الدراسات المستقبلية لتفاعلات PARP-1.
درس تآو وزملاؤه (الجمعة) هذا السؤال.