الفسفرة الذاتية لإنزيم الكيناز المعتمد على الحمض النووي الريبي مزدوج السلسلة.

إنزيم الكيناز المعتمد على الحمض النووي الريبي مزدوج السلسلة (dsRNA) (كيناز p68) المستخرج من خلايا الإنسان المعالجة بالإنترفيرون هو بروتين وزنه الجزيئي 68,000 يتم استحثاثه بواسطة الإنترفيرون. باستخدام جسم مضاد أحادي النوع محدد، تمكنا من دراسة النشاطين المميزين لإنزيم الكيناز الخاص بـ p68. النشاط الأول يعمل على الفسفرة الذاتية للإنزيم (كيناز p68)، بينما النشاط الثاني مسؤول عن فسفرة الركائز الخارجية مثل عامل بدء النسخ 2 والهيستون. عند تنشيطه بواسطة dsRNA في وجود Mn2+ وATP، يتم فسفرة k68 ذاتيًا، ويصبح بعد ذلك قادرًا على تحفيز فسفرة الهيستون في غياب dsRNA. بينما يرتبط ارتباط 8-أزيدو-alpha-32P ATP (8-N3ATP) بـ p68 كيناز اعتمادًا على كل من dsRNA وMn2+، يرتبط كيناز p68 الفسفوري بـ 8-N3ATP بغض النظر عن dsRNA. يتوافق هذا مع متطلبات dsRNA للفسفرة الذاتية لـ p68 كيناز، لكن ليس لفسفرة الركائز الخارجية. يرتبط كيناز p68 بشكل أساسي بالرسبيوم. يمكن استرداده بكفاءة بواسطة محلول يحتوي على كل من الملح العالي والمنظف غير الأيوني. يتم تحفيز تركيب كيناز p68 عدة مرات بواسطة الإنترفيرون في أنواع مختلفة من خلايا الإنسان. أظهرت التحلل الجزئي لمستخلص 35Smethionine وتحضير كيناز p68 المسمى بـ 8-N3ATP بواسطة بروتياز Staphylococcus aureus V8 وجود بولي ببتيد رئيسي وزنه الجزيئي 48,000 (p48) مع موقع خاص لارتباط ATP. من المحتمل أن تحتوي p48 على الوحدة التحفيزية لـ p68 كيناز وأنها مماثلة لبروتين مشابه وصفناه سابقًا كواحد مميز موجود في شكل مرتبط مع كيناز p68. نعتقد الآن أن وجود p48 في تحضيرات الكيناز المنقاة سابقًا كان بسبب تحلل جزئي لـ p68 كيناز.