نظام ناقلات ثلاثية محسنة لتحويل الذرة السريعة بواسطة Agrobacterium

يتم وصف نظام ناقلات ثلاثية بسيط ومرن يستخدم بلازميدات ملحقة محسّنة لتحويل الذرة السريعة. يسهل هذا النظام بناء ناقلات عالية السعة وتحويل النباتات. البلازميد الفائق الثنائي pSB1 هو ركيزة أساسية في تحويل الذرة. ومع ذلك، فإن الحجم الكبير للناقلة الأساسية يجعل من الصعب استنساخها، وعملية التكامل المشترك مرهقة وغير فعالة، وبعض سلالات Agrobacterium معروفة بأنها تنتج طفرات عفوية مقاومة للتتراسيكلين. تمثل هذه القيود عوائق كبيرة أمام بناء ناقلات ذات سعة عالية. هنا، نصف نظام ناقلات ثلاثية أصغر وأبسط ومرن لتحويل الذرة يستخدم بلازميدات ملحقة محسّنة لا تتطلب خطوة التكامل المشترك. بالإضافة إلى ذلك، استعدت البلازميدات الملحقة التي تم وصفها حديثًا الجينات الفتاكة التي وجدت معيبة في pSB1، بالإضافة إلى إضافة جينات فتاكة جديدة. إن اختبار تكوينات مختلفة من البلازميدات الملحقة بالاقتران مع الناقل الثنائي T-DNA كناقلات ثلاثية يضاعف تقريبًا كل من تردد التحويل الخام وعدد أحداث التحويل ذات الجودة القابلة للاستخدام في سلالات الذرة التي يصعب تحويلها. مكنت الناقلات الثلاثية التي تم وصفها حديثًا من تطوير طريقة سريعة لتحويل الذرة لسلالات النخبة. سهل نظام الناقلات هذا اختبار أصول متعددة للتكرار على البلازميد الملحق وناقلة T-DNA، وتم تحديد أربعة تركيبات لها تردد تحويل خام مرتفع (86-103%) في سلالة ذرة نادرة النخبة.