التصنيع الحيوي لجسيمات نانو مستمدة من الطماطم

تكتسب الفقاعات الصغيرة والصغيرة جداً (MVs و NVs، على التوالي) المأخوذة من المصادر النباتية الصالحة للأكل اهتمامًا متزايدًا باعتبارها مواد خضراء ومستدامة ومتوافقة حيويًا لتطوير ناقلات التوصيل من الجيل التالي. يعتبر عزل الفقاعات من مصفوفات نباتية معقدة تحديًا كبيرًا نظرًا للمقايضة بين العائد والنقاء. هنا، استخدمنا الطرد المركزي التفاضلي (dUC) للإنتاج الضخم لـ MVs و NVs من فواكه الطماطم (Solanum lycopersicum L.) وحللنا خصائصها الفيزيائية والشكلية وملفات الحمل الحيوية. تشارك شحنات البروتين والفوسفوليبيد أوجه تشابه كبيرة بين MVs و NVs. كان حمض الفوسفاتي أكثر فوسفوليبيد وفرة تم التعرف عليه في NVs و MVs. تم تنقية عزلات الفقاعات الكبرى بشكل إضافي باستخدام الطرد المركزي بتدرج كثافة السكروز (gUC) أو كروماتوغرافيا الاستبعاد الحجم (SEC). أظهرنا أن SEC باستخدام عمود الجاذبية أزال بفعالية مكونات المصفاة المرافقة بما في ذلك البروتينات والأنواع الجزيئية الصغيرة. أدت دالة dUC/SEC إلى الحصول على عائد كبير من الفقاعات المنقاة من حيث عدد الجزيئات (2.6 × 10^15 جزء) وكميات البروتين (6.9 ± 1.5 ملغ) لكل كيلوغرام من الطماطم. فصلت طريقة dUC/gUC مجموعتين من الفقاعات بناءً على الكثافة الطافية. تدعم دراسات البروتيوميات والدراسات الحاسوبية حول MVs و NVs المُنقاة بواسطة SEC وجود فقاعات داخل-وخارج الخلوية مختلفة تحتوي على ليبوكسجيناز (LOX) وفوسفاتاز ATP وبروتينات صدمة حرارية (HSPs)، فضلاً عن مجموعة من البروتينات التي تتداخل مع ما تم الإبلاغ عنه سابقًا في بلاستيدات الطماطم.