Key points are not available for this paper at this time.
يعد التشخيص الجزيئي لمرض فون ويلبراند (VWD) معقدًا بشكل خاص. جين عامل فون ويلبراند (VWF) يمثل جينًا جسديًا كبيرًا وعالي التعدد الأشكال، وهناك جين زائف جزئي متجانس للغاية (>96%) في الكروموسوم 22. بسبب هذه الصعوبات، تأخرت تطبيق الدراسة الجزيئية لـ VWD في الروتين السريري بشكل كبير. يمكن أن تحوّل التقدمات الحديثة في تكنولوجيا التسلسل والمعلوماتية الحيوية التسلسل المباشر الكامل لـ VWF إلى أداة تشخيصية روتينية لـ VWD، وهو أمر مرغوب فيه بشكل خاص في النوعين 1 و3. تصف هذه الدراسة إجراءً محسنًا للغاية يتم فيه تضخيم جميع المناطق الترميزية والمناطق الداخلية المحيطة بـ VWF تحت معايير إعداد حرارية متماثلة في تنسيق لوحة PCR جاهزة للاستخدام. يمكن إجراء عملية التسلسل بالكامل، من استخراج الدم إلى تحديد الطفرات، في غضون 24 ساعة، مما ينتج عنه استراتيجية بسيطة ومرنة وفعالة من حيث التكلفة مع متطلبات زمنية قليلة. للتحقق من الطريقة، قمنا بتنفيذ تسلسل VWF الكامل لـ 21 حالة أساسية بما في ذلك سبعة من كل نوع من أنواع VWD. تم تحديد ما مجموعه 30 تباينًا جينيًا في VWF. من بين هذه التغيرات، هناك اثنا عشر تغيرًا جديدًا، بما في ذلك أربع طفرات تغير معنى، وطفرات عديمة المعنى، وإدراج واحد، وأول إدراج-حذف تم وصفه في VWF، و5 طفرات محتملة لمواقع الربط. وفقًا لمعرفتنا، فإن هذه هي أسرع وأكثر البروتوكولات كفاءة المصممة حتى الآن لتسلسل كامل المنطقة الترميزية لـ VWF في التشخيص الجزيئي لـ VWD.
درس كوراليس وآخرون (الخميس) هذا السؤال.