التثبيت الكيميائي الأصلي في تخليق البروتين ونصف التخليق

يوفر التثبيت الكيميائي الأصلي (NCL) وسيلة فعالة للغاية ومرنة لربط أجزاء البيبتيد والبروتين غير المحمية بشكل انتقائي كيميائيًا لتوليد البروتينات. لقد أدت القدرة على دمج الأحماض الأمينية غير البروتينية (مثل الأحماض الأمينية d- أو العلامات الفلورية) والتعديلات بعد الترجمة إلى البروتينات من خلال تجميع أجزاء البيبتيد إلى تطورات هامة للغاية في علم البيبتيد والبروتينات على مدى العشرين عامًا الماضية. لقد ساعدت التمديدات لمفهوم NCL الأصلي (بما في ذلك تطوير الأحماض الأمينية المؤلفة من الثيول والسلنيول وطرق إزالة الكبريت وإزالة السيلينيوم) ، وتحسين الوصول إلى ثيوسترات البيبتيد ، واستخدام هذه المنهجية بالاقتران مع قطع البوليببتيد المعبر عنها بشكل إعادة التركيب (التي يطلق عليها التثبيت البروتيني المعبر عنه ، EPL) في توسيع فائدة المنهجية. على مدار السنوات الخمس الماضية ، كان هناك زيادة دراماتيكية في عدد البروتينات التي تم الوصول إليها من خلال التخليق الكيميائي الكامل ونصف التخليق ، بما في ذلك مجموعة واسعة من البروتينات المعدلة؛ كما تم تسجيل أرقام قياسية جديدة فيما يتعلق بحجم البروتينات التي يمكن الوصول إليها الآن من خلال كيمياء التثبيت. معاً ، كانت هذه الجهود قد ساهمت في تحسين فهم هيكل البروتين ووظيفته ، ولكنها أيضًا قد دفعت الابتكارات في علم البروتينات. في هذه المراجعة التعليمية ، نهدف إلى تقديم القارئ بأحدث التطورات في تقنيات التثبيت المعتمدة على NCL وEPL بالإضافة إلى أمثلة توضيحية لاستخدام هذه الطرق ، مع منطق صناعي ، للوصول إلى البروتينات والبروتينات المعدلة من أجل الدراسة البيولوجية.