تسامي/إعادة تبلور المصفوفة لتحليل صور البروتينات بواسطة مطيافية الكتلة بدقة مكانية عالية

لقد استخدمنا ترسيب المصفوفة عن طريق التسامي لتحليل صور البروتينات على شرائح الأنسجة باستخدام عملية ترطيب/إعادة تبلور تنتج طيف الكتلة عالي الجودة وصور أيون بدقة مكانية عالية. لقد قمنا بالتحقيق نظامياً في بروتوكولات الغسيل المختلفة، وتأثير سمك شريحة الأنسجة، وكمية المصفوفة المتبخرة لكل وحدة مساحة، وظروف إعادة التبلور المختلفة. تُظهر النتائج أن شطف المذيب العضوي يليه شطف بالاثانول/الماء يزيد بشكل كبير من الحساسية لاكتشاف البروتينات. إن كل من سمك شريحة الأنسجة وكمية حمض السينابينغ المتبخر لكل وحدة مساحة لها نطاقات مثالية لشدة إشارة البروتين القصوى. تم تقديم صور الأيونات لشرائح أدمغة الفأر والجرذ بدقة مكانية 50 و20 و10 ميكرومتر، ويتم ربطها بالصور الضوئية المصبوغة بالهيماتوكسيلاين والإيوسين (H&E). للتحليل المستهدف، يمكن إجراء التصوير الموجه بواسطة علم الأنسجة باستخدام هذا البروتوكول حيث يتم إجراء تحليل MS وصبغ H&E على نفس الشريحة.