التحليل الحركي للتحلل المائي لجوانوزين 5'-ثلاثي الفوسفات المرتبط بتكوين التوبولين

تمت دراسة العلاقة بين مسارات الزمن لتكوين التوبولين النقي والتحلل المائي لجوانوزين 5'-ثلاثي الفوسفات (GTP) المصاحب عند تركيزات مختلفة من التوبولين ضمن النطاق الذي يتغير فيه معدل التكوين مع تعاون قوي. تم العثور على جزيء واحد من GTP يتحلل لكل جزيء من ديمر التوبولين المدمج في الميكروتيوب. لم يكن هذا التحلل مترابطًا بشكل صارم مع البوليمرization وحدث في خطوة لاحقة. وبالتالي، في المراحل الأولى من التكوين، معقد التوبولين-GTP هو المكون الرئيسي المؤقت للميكروتيوب. تم معالجة بيانات التحلل المائي لـ GTP ضمن نموذج لتفاعلين متتاليين من الدرجة الأولى: التوبولين-GTPfree k1 يؤدي إلى التوبولين-GTPMT k2 يؤدي إلى التوبولين-GDPMT + Pi. تقدم التحلل المائي لـ GTP بمعدل جوهري k2 = 0.25 دقيقة^-1 مستقل عن تركيز التوبولين. أشارت القياسات المتزامنة لتكوين البوليمرات، نشاط GTPase، ودمج 3HGTP متبوعة بمتابعة GTP غير الموسومة إلى أنه قبل تحلله كان GTP المرتبط بالميكروتيوب قابلًا للتبادل بينما بعد التحلل ظل GDP محاصرًا في موقع E. يناقش الاحتمال أنه بعد التكوين يتعرض التوبولين لتغيير في الشكل يمكن أن يحفز التحلل المائي لـ GTP وحجز GDP.