Key points are not available for this paper at this time.
تم إجراء تكبير PCR لمناطق الحمض النووي الريبوسومي 16S/23S من تسلسلات 16S و23S المحفوظة لعينات الحمض النووي الجينومي من سلالات تمثل 16 نوعًا من البكتيريا (12 جنسًا). تم إنتاج منتجات متعددة تحتوي على تسلسلات متجانسة محفوظة عند النهايتين 3' و5'، تفصل بينها تسلسلات فاصل داخلية عالية التغير. هذه المنتجات تفاعلت بشكل متبادل مكونة هياكل الحمض النووي هيترو دوبلكس تحتوي على نهايات مزدوجة محاطة بحلقة داخلية أحادية السلسلة. تم إنتاج الحمض النووي أحادي السلسلة أيضًا في تكبير تسلسلات فواصل الحمض النووي الريبوسومي. تم التعرف على قطع الحمض النووي التي تتكون من مكونات غير هومودوبلكس من خلال قابليتها للإزالة عن طريق الهضم بواسطة إنزيم نوكلياز أحادي السلسلة. تم تقليل نسبة تكوين الهيدرو دوبلكس والحمض النووي أحادي السلسلة بظروف التفاعل التي تعزز من تقارب البرايمر/القالب، على سبيل المثال، زيادة القوة الأيونية، وزيادة تركيز البرايمر، وانخفاض درجة حرارة التقارب، بالإضافة إلى تقليل عدد دورات التكبير. تم أيضًا إنتاج هياكل الحمض النووي هيترو دوبلكس وأحادي السلسلة من خلال تغيير درجة الحرارة وإعادة تقارب منتجات التكبير في غياب نشاط البلمرة. في حين أن هياكل الهيدرو دوبلكس والحمض النووي أحادي السلسلة تقدم معلومات إضافية تكون مفيدة في التمييز بين أنواع البكتيريا التي تنتج منتجات هومودوبلكس مشابهة، فإن حركة هياكل الحمض النووي هيترو دوبلكس وأحادي السلسلة حساسة للغاية لظروف electrophoretic.
درس جينسن وآخرون (الأربعاء) هذا السؤال.