Key points are not available for this paper at this time.
إن إنزيم أسيتوأسيتات ديكاربوكسيلاز من Clostridium acetobutylicum (AAD) يحفز الديكاربكسيل من الأسيتوأسيتات عبر وسيط قاعدة شيف. اقترح ويستهيمر وزملاؤه أن pKa لليسين 115 ينخفض بسبب القرب المكاني من مجموعة الإيpsilon-أمونيوم لليسين 116. لقد قمنا بدراسة هذا الاقتراح من خلال دراسة طفرات موجهة لمواقع الليسين 115 والليسين 116. كانت هناك استبدالات اثنتان لليسين 115 (K115C و K115Q) غير نشطة حافزياً عند pH 5.95، وهو مستوى pH الأمثل لنوع AAD البري، مما يوضح أهمية هذا المتبقي في الحفز. يمكن استعادة النشاط لـ K115C من خلال الأمينو إيثيل مع بروميد 2-برومو إيثيل-أمونيوم (2-BEAB). كانت الاستبدالات في الليسين 116 (K116C و K116N و K116R) لها أنشطة مخفضة ولكن ملحوظة عند pH 5.95. تم تقييم تأثيرات الليسين 116 على pKa لليسين 115 في AAD الطفرية بعد تكوين الإيمين مع 5-نيتروسالسيل ألدهيد وتقليلها باستخدام NaBH4. بينما كانت pKa لليسين 115 في K116R مماثلة لتلك الملاحظة لنوع AAD البري، كانت صيغ pKa لليسين 115 في K116C و K116N مرتفعة لأكثر من 9.2. أسفرت الميثلة لكيس 116 في K116C باستخدام 2-BEAB عن كلا من تنشيط ملحوظ واستعادة pKa لليسين 115 إلى 5.9. تدعم هذه البيانات فرضية ويستهيمر بأن pKa لليسين 115 الذي يشكل قاعدة شيف ينخفض بسبب قربه المكاني من مجموعة الإيpsilon-أمونيوم لليسين 116.
درس هايبارغر وزملاؤه (Mon,) هذا السؤال.
Synapse has enriched 5 closely related papers on similar clinical questions. Consider them for comparative context: