التخزين طويل الأمد للـ RNA الخالي من الحمض النووي لاستخدامه في دراسات اللقاحات

تمثل RNA التكافئي مركبات محتملة لنقل اللقاحات، ولكن تعتبر غير مستقرة للغاية لمثل هذا الاستخدام. درس هذه الدراسة استرجاع، سلامة ووظيفة RNA التكافئي الذي تم نسخه في المختبر ويشفر بروتينات فيروس التهاب الكبد C (HCV). لإزالة الحمض النووي المتبقي، تمت معالجة RNA بمستحضر TURBO DNase، تلاه مجموعة DNase من RNeasy وتم تنقيته من خلال عمود RNeasy. تم تجفيف RNA بالتجميد في ماء مقطر أو تريهالوز، وتخزينه تحت غاز النيتروجين لمدة تصل إلى 10 أشهر وتحليله في نقاط زمنية مختلفة. كان استرجاع RNA المخزن عند أو أقل من 4 درجات مئوية والذي تم تجفيفه بالتجميد في ماء مقطر يتراوح بين 66% إلى الصفر من ذلك المسترجع من RNA المجفف بالتجميد في 10% تريهالوز، وهو رقم يعتمد على مدة التخزين. على النقيض من ذلك، كان استرجاع RNA المخزن في تريهالوز مرتفعًا باستمرار لجميع النقاط الزمنية. بعد الاسترجاع، كانت كلتا الـ RNAs قادرة على الترجمة وعبّرت عن مستويات عالية من البروتينات بعد التحويل، على الرغم من أن مستوى التعبير من RNA المخزن في تريهالوز كان أعلى باستمرار. وبالتالي، فإن إضافة تريهالوز سمحت بالتخزين المستقر لـ RNA الوظيفي عند 4 درجات مئوية لمدة تصل إلى 10 أشهر، مما يسمح بتطوير لقاحات RNA، حتى في البلدان النامية حيث يمكن تحقيق الحد الأدنى من ظروف التخزين (مثل 4 درجات مئوية).