بدء المسار الخارجي للتخثر. ارتباط العامل VIIa بخط خلوى يعبر عن العامل النسيجي.

لقد قمنا بدراسة التجميع الأولي للمسار الخارجي لتخثر الدم على أسطح الخلايا باستخدام العامل VIIa البشري المعلم نظريًا وخط خلوى لرئة الجنين البشري يحتوي على نشاط وفير من العامل النسيجي الوظيفي. تم ملاحظة ارتباط العامل VIIa بهذه الخلايا وكان ذلك يعتمد على الزمن ودرجة الحرارة. كان ارتباط العامل VIIa كميًا مكافئًا عند 37 و 6 درجات مئوية، على الرغم من أن حركية الارتباط كانت مختلفة. كان ligand المحتوي على إشعاع ملحوظ لا يمكن تمييزه عن العامل VIIa المعروض من خلال تحليل هلام الصوديوم دودسيل سلفات - بولي أكريلاميد. تأثر ارتباط العامل VIIa بأيونات الكالسيوم. يبدو أن الارتباط يتضمن على الأقل فئتين من مواقع الارتباط المعتمدة على الكالسيوم. حدث الارتباط الأمثل عند 2 مليمول من الكالسيوم لكلا الفئتين من المواقع، وكان هناك تثبيط للارتباط بالمواقع عالية الارتباط عند مستويات أعلى من الكالسيوم. كان ارتباط العامل VIIa محددًا، وقابلًا للإشباع، وكان له قيمة Kd تبلغ 123 +/- 37 pm، وتفاعل العامل VIIa مع حوالي 100,000 موقع ارتباط لكل خلية. بمجرد إقامته، كان الارتباط المحدد قابلًا للعكس بسرعة. تم أيضًا ملاحظة ارتباط مباشر للعامل X البشري وكان يعتمد على الكالسيوم والزمن ودرجة الحرارة. كان ارتباط العامل X محددًا وقابلًا للإشباع مع نصف الارتباط الأقصى عند 87.6 +/- 27.4 نانومتر إلى 6.03 +/- 1.03 × 10(6) موقع لكل خلية. كان الارتباط عالي الانجذاب للعامل VIIa مرتبطًا بتوليد العامل Xa. تم ملاحظة علاقة خطية مباشرة عند ارتباط العامل VIIa المنخفض؛ ومع ذلك، عند مستويات أعلى من العامل VIIa المرتبط، كانت العلاقة غير ستويكيمترية، أي أن كمية أقل من العامل Xa تم تكوينها لكل مول من العامل VIIa. يوفر التعبير عن مواقع الارتباط المحددة للعوامل VIIa و X مزيدًا من الإثبات للتجميع الجزيئي المفترض لبدء تسلسل تجلط المخثر الخارجي على الخلايا.