البروتين الدهني البشري E3 في محلول مائي. I. دليل على وجود منطقتين هيكليتين.

تمت دراسة استقرار وهيكل البروتين الدهني البشري (أبو) E3 في محلول مائي من خلال تحليل إنحلال الجوانيدين HCl والبروتوليز المحدود. كانت منحنى إنحلال الجوانيدين HCl، كما تم رصده بواسطة طيفية التمايل الدائري، ثنائي الطور؛ حيث حدثت نقطتا الانتقال المركزية عند 0.7 و 2.5 م الجوانيدين HCl، مما يشير إلى وجود هياكل وسيطة مستقرة في انكشاف أبو E. أظهر البروتوليز المحدود لأبو E باستخدام خمسة إنزيمات منطقتين مثابرتين للبروتوليز، المنطقة الأمينية الطرف (البقايا 20-165) والمنطقة الكربوكسيلية الطرف (البقايا 225-299). كانت المنطقة بينهما عرضة بشدة للقطع البروتولي. نظرًا لتشابهها مع المناطق المقاومة للبروتوليز، تم استخدام شظايا أبو E الأمينية الطرف (البقايا 1-191) والكربوكسيلية الطرف (البقايا 216-299) كنماذج للمنطقتين. أعطى إنحلال الجوانيدين HCl لشظايا الكربوكسيلية والطرف الأميني نقاط انتقال عند 0.7 و 2.4 م الجوانيدين HCl، على التوالي. تؤكد النتائج أن المناطق التي تم تحديدها من خلال البروتوليز المحدود تتوافق مع المنطقتين المكتشفتين من خلال تجارب إنحلال البروتين. لذلك، فإن شظايا البروتوليز مفيدة كنماذج للمنطقتين. كانت الطاقة الحرة للانحلال المحسوبة من منحنيات انحلال أبو E السليم أو النماذج المنطقية حوالي 4 و 8-12 كيلو كالوري/مول للمنطقتين الكربوكسيلية والأمينية الطرف، على التوالي. القيمة للمنطقة الكربوكسيلية مشابهة لتلك الخاصة بالبروتينات الدهنية الموصوفة سابقًا، في حين أن القيمة للمنطقة الأمينية الطرف أعلى بكثير وتشبه تلك الخاصة بالبروتينات الكروية القابلة للذوبان. تقترح هذه الدراسات أنه في المحلول المائي، فإن أبو E تختلف عن البروتينات الدهنية الأخرى حيث تحتوي على منطقتين هيكليتين متميزتين ذات استقرارية مختلفة بشكل ملحوظ: منطقة أمينية الطرف ومنطقة كربوكسيلية الطرف، مفصولة ببقايا قد تعمل كمنطقة مفصل.