تحرير الجينوم المبرمج بواسطة RNA في خلايا البشر

تستخدم أنظمة المناعة CRISPR من النوع II في البكتيريا إنزيم DNA مؤثر معتمد على RNA مزدوج، Cas9، لقص DNA الغريب في مواقع محددة. نحن هنا نظهر أن Cas9 يتجمع مع RNAs توجية هجينة في خلايا البشر ويمكن أن يحفز تكوين كسور في خيوط DNA مزدوجة (DSBs) في موقع مكمل لتسلسل RNA التوجيهي في DNA الجينوم. تتطلب هذه النشاط القص كل من Cas9 والرابط المكمل لـ RNA التوجيهي. تظهر التجارب التي تستخدم مستخلصات من خلايا مغايرة أن تعبير RNA و/أو التجميع إلى Cas9 هو العامل المحدد لقص DNA المعتمد على Cas9. بالإضافة إلى ذلك، نجد أن تمديد تسلسل RNA عند الطرف 3' يعزز نشاط استهداف DNA في الكائن الحي. تلك النتائج تظهر أن تحرير الجينوم المبرمج بواسطة RNA هو استراتيجية سهلة لإدخال تغييرات جينية محددة في خلايا البشر. DOI:http://dx.doi.org/10.7554/eLife.00471.001.