Key points are not available for this paper at this time.
لقد طورنا نهجًا لفرز مصفوفات مرتبة من مستنسخات الكروموسوم الاصطناعي للخميرة (YAC) التي تحتوي على الحمض النووي البشري استنادًا إلى تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR). يهدف هذا النهج إلى تحديد مواقع المستنسخات الإيجابية ضمن مكتبة YAC المخزنة كمستنسخات فردية في لوحات ميكروتيتر ذات 96 بئرًا. إن الحساسية العالية والخصوصية لتفاعل البوليميراز المتسلسل تسمح بالكشف عن تسلسلات الهدف في الحمض النووي المحضر من مجموعات من 1920 مستنسخًا من YAC أو أكثر. يتم تنفيذ بروتوكول الفرز القائم على تفاعل البوليميراز المتسلسل على مرحلتين متتاليتين، مما يحدد بفعالية موقع المستنسخ الإيجابي إلى أربع لوحات ميكروتيتر (384 مستنسخًا). يتم إنجاز تحديد المواقع النهائية لكل مستنسخ إيجابي من خلال الهجين التقليدي للحمض النووي.DNA باستخدام فلتر واحد يحتوي على مستنسخات YAC من اللوحات الأربع المناسبة. لقد أثبتت هذه الاستراتيجية القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل فعاليتها العالية، مما سمح بتحديد وعزل العديد من مستنسخات YAC التي تحتوي على جينات بشرية محددة. يتم مناقشة آفاق تطوير استراتيجية لفرز مكتبات YAC تعتمد بالكامل على تجارب PCR، فضلاً عن التطبيقات المحتملة لهذا النهج في التحليل المنهجي للجينوم البشري.
درس غرين وآخرون (Thu,) هذا السؤال.