Key points are not available for this paper at this time.
الخلفية: إن إعادة توجيه خلايا القاتل الطبيعي (NK) بواسطة مستقبلات المستضدات الشيميرية (CAR) جذابة في تطوير علاجات CAR الجاهزة للاستخدام لعلاج السرطان. ومع ذلك، لا يزال الإدماج المحدد لموقع جين CAR في خلايا NK يمثل تحديًا. الطرق: في هذه الدراسة، قمنا بتعديل جيني لخلايا الجذع المستحثة متعددة القدرات البشرية (iPSCs) باستخدام تقنية أصابع الزنك النوكلياز (ZFN) لإدخال cDNA ترميز لـ CAR مضاد لـ EpCAM في موقع إدماج الفيروس المرتبط بالغدة 1، وهو "ملاذ آمن" لإدخال الجينات في الجينوم البشري، ومن ثم قمنا بتمايز iPSCs المعدلة إلى خلايا iNK التي تعبر عن CAR. النتائج: اكتشفنا الإدماج المستهدف في 4 من 5 سلالات iPSC المختارة، 3 منها تم تعديلها بشكل ثنائي الأليلي. أظهر تحليل Southern blotting عدم وجود أحداث إدماج عشوائية. تم الحصول بنجاح على خلايا iNK من iPSCs المعدلة باستخدام بروتوكول لمدة 47 يومًا، والتي كانت مشابهة من الناحية الشكلية لخلايا NK في الدم المحيطي، وعرضت نمط ظاهري لخلايا NK (CD56+CD3-)، وأظهرت تعبيرًا عن مستقبلات NK. تم تأكيد تعبير CAR لخلايا NK المستمدة من iPSC بواسطة تحليل RT-PCR وقياس التدفق الخلوي. أكدت اختبارات السمية الخلوية في المختبر مرة أخرى على نشاطها الجذري ضد خلايا السرطان الإيجابية لـ EpCAM المقاومة لخلايا NK، ولكن ليس ضد الخلايا الطبيعية الإيجابية لـ EpCAM، مما يدل على تحمل خلايا CAR-iNK تجاه الخلايا الطبيعية. الاستنتاج: بالنظر إلى المستقبل، تمتلك iPSCs المعدلة التي تم توليدها في هذه الدراسة إمكانات كبيرة كمصدر غير محدود عمليًا لتوليد خلايا iNK CAR المضادة لـ EpCAM.
درس تانغ وآخرون (سون،) هذا السؤال.