ترابط الليجند اللاصق مع الإنتغرين ألفا IIb بيتا 3 يحفز الفسفورية التيروزينية لمستضدات بروتينية جديدة قبل فسفورية pp125FAK

تُحفز الفسفورية التيروزينية للعديد من البروتينات الصفائحية بواسطة الثيرومبين وعوامل أخرى تسبب تجميع الصفائح و إفرازها. تعتمد فسفورية مجموعة من هذه البروتينات، بما في ذلك بروتين كيناز التيروزين، pp125FAK، على تجميع الصفائح الذي يتبع ارتباط الفيبرينوجين مع الإنتغرين ألفا IIb بيتا 3. في هذا التقرير، فحصنا ما إذا كان ارتباط الفيبرينوجين، بحد ذاته، يحفز عملية الفسفورية التيروزينية في غياب العوامل الخارجية. تم تحفيز ارتباط الفيبرينوجين القابل للذوبان باستخدام قطع Fab من جسم مضاد مضاد-بيتا 3 (anti-LIBS6) الذي يكشف مباشرة موقع ارتباط الفيبرينوجين في ألفا IIb بيتا 3. تم فسفورية بروتينات تتراوح أوزانها من 50-68 كيلو دالتون و 140 كيلو دالتون على بقايا التيروزين بطريقة تعتمد على الفيبرينوجين. لم تتطلب هذه الاستجابة تخليق بروستاغلاندين أو زيادة في الكالسيوم الحر السيتوزولي أو تجميع الصفائح أو إفراز الحبيبات، ولم تكن مرتبطة أيضًا بفسفورية التيروزين لـ pp125FAK. لوحظت الفسفورية التيروزينية للبروتينات التي تتراوح أوزانها من 50-68 كيلو دالتون و 140 كيلو دالتون أيضًا عندما (أ) تم تحفيز ارتباط الفيبرينوجين بواسطة عوامل مثل الأدرينالين أو ADP أو الثيرومبين بدلاً من anti-LIBS6؛ (ب) تم استخدام قطعة X، وهي قطعة مزدوجة مشتقة من البلاسمين من الفيبرينوجين بدلاً من الفيبرينوجين؛ أو (ج) تم ربط مجمعات ألفا IIb بيتا 3 بواسطة الأجسام المضادة، حتى في غياب الفيبرينوجين. بالمقابل، لم يتم ملاحظة أي فسفورية تيروزينية عندما تكون الليجند عبارة عن ببتيدات تعريف الخلية أحادية الجزيء المشتقة من الفيبرينوجين (RGDS أو غاما 400-411). تم تثبيط الفسفورية التيروزينية المعتمدة على الفيبرينوجين بواسطة سايتوكالاسيني D. تُظهر هذه الدراسات أن ارتباط الفيبرينوجين مع ألفا IIb بيتا 3 يُinitiates عملية الفسفورية التيروزينية التي تسبق تجميع الصفائح وفسفورية pp125FAK. قد تعتمد هذه التفاعل على تجميع مستقبلات الإنتغرين وعلى حالة بلمرة الأكتين، والعمليات التنظيمية التي قد تضع كينازات التيروزين مع مستضداتها.