Key points are not available for this paper at this time.
يمكن قياس تدفق الابتلاع بناءً على تراكم LC3B المدهن في وجود مثبطات الابتلاع في المرحلة المتأخرة. تم تطبيق هذه الطريقة على نطاق واسع لتحديد مركبات جديدة تنبه الابتلاع. هنا نقوم بدراسة هذه الطريقة ونظهر أن bafilomycin A1 (BafA) وليس الكلوروكين هو المناسب لقياس التدفق بسبب تأثير الكلوروكين المحفز على دهن LC3B غير الكلاسيكي. لم يكن بالإمكان ملاحظة زيادة كبيرة في تدفق الابتلاع بواسطة الراباميسين إلا عند دمجه مع تركيزات BafA التي لا تؤثر على التدفق القاعدي، وهو شرط خلق عنق الزجاجة، بدلاً من حظر اندماج جزيئات الابتلاع والليزوزومات بالكامل، متزامناً مع تحفيز الابتلاع. عندما تم دمج الراباميسين مع تركيزات مشبعة من BafA، لم يمكن الكشف عن زيادة كبيرة أخرى في دهن LC3B فوق المستويات التي حدثت بسبب المثبط في المرحلة المتأخرة. تتيح نافذة الاختبار الكبيرة التي تم الحصول عليها من خلال هذه الطريقة تمييزاً فعالاً لم Activators الابتلاع بناءً على قوتها الخلوية. لإثبات صحة هذه الطريقة، نعرض أن مثبطًا جديدًا للـ acetyltransferase EP300 ينبه الابتلاع بطريقة تعتمد على mTORC1. نقترح أن إنشاء خلفية حساسة بدلاً من حظر كامل لركيزة الابتلاع هو المطلوب لالتقاط التغيرات في تدفق الابتلاع بشكل كمي.
درس Liebl وآخرون (الجمعة) هذا السؤال.