تجميع ووظيفة مجمع البروثرومبيناز البشري على مجموعات خلايا الدم المحيطية المعزولة.

يتكون مجمع البروثرومبيناز للتخثر من مركب معتمد على غشاء ومرتبط بعنصر Ca2+ من العامل المساعد العامل Va والإنزيم العامل Xa، والذي يسرّع التحول التحللي للبروثرومبين إلى ثرومبين. تسمح تحليلات الحركيات لتنشيط البروثرومبين بحساب النسبة المولية ومعايير الارتباط التي تحكم التفاعلات الوظيفية بين العامل Va والعامل Xa مع الصفيحات البشرية المعزولة التي نشطت بواسطة الثرومبين ومجموعات فرعية من كريات الدم البيضاء المعزولة. تشير مقاربتنا الحركية إلى أن العامل Xa يرتبط بما يقرب من 2700 +/- 1000 (n = 8) مواقع وظيفية على سطح الصفيحات المنشطة بواسطة الثرومبين مع ثابت تفكك ظاهر (Kd) يساوي 1.18 +/- 0.53 × 10(-10) M وkcat يساوي 19 +/- 7 مول من الثرومبين/ثانية/مول من العامل Xa المرتبط. تحافظ مخزونات العامل V في الصفيحات الطبيعية على تحديد مماثل لمواقع ارتباط العامل Va الوظيفية. تشير التجارب التي أجريت باستخدام صفيحات من فرد يعاني من نقص في مستضد العامل V إلى أن العامل Va والعامل Xa يشكلان مجمعاً نسبته 1:1 على سطح الصفيحات المنشطة بواسطة الثرومبين. تحكم كلا منحنيات الارتباط بنفس Kd الظاهر (تقريباً يساوي 10(-10) M) وتعبر عن نفس kcat/موقع (14-17 ثانية-1). لا تتغير معايير ارتباط العامل Xa بالصفيحات باستخدام مختلف المحفزات للصفيحات، أو اختيار مضاد التخثر، أو إجراء غسيل الصفيحات. تشير حركيات تنشيط البروثرومبين أيضاً إلى أن المونوسيتات واللمفاويات والعدلات تحتوي على، على التوالي، 16,000، 45,000، و8,000 مواقع مستقبلات العامل Va-العامل Xa/خلية، والتي تحكم جميعها بواسطة Kd ظاهر تقريباً يساوي 10(-10) M. تظهر المجمعات الإنزيمية المرتبطة بالمونوسيتات أو العدلات قيم kcat مشابهة للمجمع المرتبط بالصفيحات. المجمعات المرتبطة باللمفاويات نشطة فقط بنسبة 25%.