نظام الكيتيناز في Bacillus circulans WL-12 وأهمية الكيتيناز A1 في تحلل الكيتين

يُعتبر Bacillus circulans WL-12، الذي تم عزله كبكتيريا محللة لجدار خلايا الخميرة، مصدرًا لمجموعة متنوعة من الإنزيمات المحللة للبوليسكاريد التي تُفرز في وسط الثقافة. عند تحفيز كيتيناز البكتيريا باستخدام الكيتين، تم الكشف عن ستة جزيئات كيتيناز متميزة في مصل الثقافة. أظهرت هذه الكيتينازات (A1، A2، B1، B2، C، وD) الأحجام ونقاط التركيز الكهربائي المتميزة التالية: Mr 74,000، pI 4.7 (A1)؛ Mr 69,000، pI 4.5 (A2)؛ Mr 38,000، pI 6.6 (B1)؛ Mr 38,000، pI 5.9 (B2)؛ Mr 39,000، pI 8.5 (C)؛ وMr 52,000، pI 5.2 (D). بين هذه الكيتينازات، كان لدى A1 و A2 أعلى أنشطة تحلل الكيتين الكولودي. أظهر كيتيناز A1 ألفة قوية تجاه الكيتين غير القابل للذوبان. أطلق الكيتيناز المنقى A1 بشكل رئيسي الكيتوبيوز (GlcNAc)2 وكمية ضئيلة من N-acetylglucosamine (GlcNAc) من الكيتين الكولودي. أشار تحليل تسلسل الأحماض الأمينية الطرفية N للكيتينازات A1 و A2 إلى أن الكيتيناز A2 تم تكوينه من الكيتيناز A1، على الأرجح عن طريق الإزالة البروتينية لجزء من الطرف C للكيتيناز A1. نظرًا لعدم قدرة الكيتيناز A2 على الارتباط بالكيتين، تم اقتراح أهمية منطقة الطرف C من الكيتيناز A1 في الألفة القوية للكيتيناز A1 تجاه الركيزة الكيتينية. يبدو أن الألفة القوية للكيتيناز كانت ضرورية للتحلل الكامل للكيتين غير القابل للذوبان. من هذه النتائج، تم الاستنتاج أن الكيتيناز A1 هو الإنزيم الرئيسي في نظام الكيتيناز لهذه البكتيريا.