العناصر النسخية الإيجابية والسلبية لجين الكولاجيناز البشري من النوع الرابع.

تم الربط بين التحلل البروتيني بواسطة الكولاجيناز من النوع الرابع (T4) وعملية انتشار الورم. يتم التعبير عن جين T4 في الخلايا الليفية، ولكن ليس في خلايا الظهارة الطبيعية، ويتم قمع تعبيره بشكل محدد بواسطة الجين المسرطن E1A الخاص بالفيروس الغدي. نقدم تحقيقًا في العناصر النسخية المسؤولة عن التعبير الأساسي، القابل للقمع بواسطة E1A، والمحدد للأنسجة. كشفت تحليلات الحذف من الطرف 5' وتصوير بصمة DNase I واختبارات تحرك الجل عن عنصر معزز قوي، قابل للقمع بواسطة E1A، وهو r2، يقع على بعد حوالي 1,650 زوج قاعدي upstream من موقع البدء. كان هذا المعزز يرتبط ببروتين له نوعية ارتباط مشابهة جدًا لعامل النسخ AP-2. تم العثور على تسلسل مثبط قوي يقع بين 2 إلى 5 زوج قاعدي downstream من هذا المعزز. قام المثبط بقمع النسخ من أي من عناصر المعزز r2 أو AP-1 وفي سياق أي من المحفزات الأساسية لجين الكولاجيناز من النوع الرابع أو كيناز الثيمين (tk)؛ كما تم قمع النسخ بدون معزز من المحفز الأساسي الأخير. تضمّن المثبط عنصرين متجاورين يعملان بشكل مستقل كمثبطين. تم إثبات التنظيم السلبي لنسخ T4 بواسطة عاملين على الأقل. تم اكتشاف بروتينات mcf-7 التي ترتبط بشكل محدد بالعناصر الاثنين بواسطة اختبارات تحرك الجل؛ وتم اكتشاف بروتين بحجم حوالي 185 كDa الذي ارتبط بأحد هذه العناصر من خلال الرابط بين الحمض النووي والبروتين. تم قمع النسخ بواسطة المثبط، في سياق معزز r2-محفز tk، بشكل أكثر كفاءة في خلايا غير منتجة لـ T4 (mcf-7 أو HeLa) مقارنة بخلايا منتجة لـ T4 (HT1080)، مما يشير إلى أن كبت النوع الخلوي المحدد قد يساهم في تنظيم هذا الجين.