استقرار RNA الداخلي والمضاف في عينات الدم والمصل والبلازما

الخلفية: يعتبر RNA المتداول في البلازما/المصل مجالًا ناشئًا للتشخيص الجزيئي غير الباضع. نظرًا لأن RNA يُعتقد عمومًا أنه غير ثابت أثناء الدوران، فقد بحثنا في الاستقرار وعوامل ما قبل التحليل المختلفة التي قد تؤثر على تركيزات RNA في عينات الدم. الطرق: تم جمع عينات الدم من 65 متطوعًا صحيًا. تمت دراسة تأثير متغيرين ما قبل التحليل: (أ) التأخير في معالجة دم EDTA ودم متجلط بعد سحب الدم، و(ب) تجميد وإذابة البلازما والمصل. كما تم التحقيق في عدم استقرار RNA المضاف الحر في البلازما. تم قياس RNA البلازما/المصل بواسطة اختبار PCR العكسي الكمي في الوقت الحقيقي لـ mRNA إنزيم الجليسيرالدهيد 3-فوسفات ديهيدروجيناز، بينما تم قياس DNA بواسطة اختبار PCR الكمي في الوقت الحقيقي لجين بيتا-غلوبي. النتائج: لم يتم العثور على فرق ذي دلالة إحصائية في تركيزات RNA في البلازما المأخوذة من دم EDTA غير المركز الذي تم تركه عند 4 درجات مئوية لمدة 0 و6 و24 ساعة (P =0.182). من ناحية أخرى، زادت تركيزات RNA في المصل بشكل ملحوظ على مدار 24 ساعة عندما تم تخزين دم متجلط غير مركزي عند 4 درجات مئوية (P < 0.001). لم يعد بالإمكان تكبير 99% من RNA المضاف الحر بعد حضنه في البلازما لمدة 15 ثانية. لم يظهر البلازما غير المجمدة، والبلازما المجمدة والمذابة، والبلازما المذابة التي تركت في درجة حرارة الغرفة لمدة ساعة اختلافات كبيرة في تركيز RNA (P =0.465). لم يُلاحظ أي فرق ذو دلالة إحصائية في المصل المجمد والمذاب (P = 0.430). الاستنتاجات: RNA البلازما ثابت في دم EDTA غير المركز المخزن عند 4 درجات مئوية، ولكن للحصول على تركيز RNA ثابت في المصل، يجب تخزين دم متجلط غير مركزي عند 4 درجات مئوية ومعالجته في غضون 6 horas. دورة تجميد/إذابة واحدة لا تنتج عنها تأثيرات كبيرة على تركيز RNA في البلازما أو المصل.