دراسات آلية لتعطيل TEM-1 و P99 بواسطة NXL104، مثبط β-lactamase غير β-lactam جديد

NXL104 هو مثبط قوي للفئة A و C من β-lactamases السيرين، بما في ذلك KPC carbapenemases. أظهرت التحليلات باستخدام مطيافية الكتلة بالتشتيت الإلكتروني (قبل وبعد تثبيط NXL104) أن الإنزيمات المعطلة شكلت رابطة تساهمية مع NXL104. تم تحديد الخصائص المثبطة الرئيسية لـ NXL104 ضد β-lactamases TEM-1 و P99، بما في ذلك نسب التقسيم، وثوابت التفكك (K)، وثوابت المعدل للتعطيل (k(2))، ومعدلات إعادة التفعيل. NXL104 هو مثبط قوي لـ TEM-1 و P99، يتميز بكفاءات عالية في الكارباميل (k(2)/K من 3.7 × 10(5) M(-1) s(-1) لـ TEM-1 و 1 × 10(4) M(-1) s(-1) لـ P99) وبتفكيك بطيء للكارباميل. تم الحصول على فقدان كامل لنشاط الـ β-lactamase عند نسبة 1/1 من الإنزيم/NXL104، مع قيمة k(3) (ثابت المعدل لتكوين المنتج والإنزيم الحر) قريبة من الصفر لـ TEM-1 و P99. تم تقييم تركيزات التثبيط الخمسين بالمئة (IC(50)) على β-lactamases المختارة، وأظهر NXL104 أنه مثبط قوي جدًا للفئات A و C من β-lactamases. كانت قيم IC(50) التي تم الحصول عليها مع NXL104 (من 3 نانومتر إلى 170 نانومتر) مشابهة عالميًا على β-lactamases CTX-M-15 و SHV-4 لتلك التي تم الحصول عليها مع المقارنات (كلابولانات، تازوباكتام، وسولباكتام) ولكنها كانت أقل بكثير على TEM-1 و KPC-2 و P99 و AmpC مقارنةً بتلك الخاصة بالمقارنات. أظهرت الدراسات المتعمقة على TEM-1 و P99 أن NXL104 لديه تقارب أو معدل تعطيل مماثل أو أفضل من الكلابولانات والتازوباكتام، وفي جميع الحالات كان هناك استقرار محسّن لمجمع الإنزيم/المثبط التساهمي.