التحليل البروتيني للحويصلات المغلفة الكلاثرين المعزولة من أرابيدوبسيس يكشف عن مكونات محفوظة تطورياً وخاصة بالنباتات

في حقيقيات النوى، تسهل الحويصلات المغلفة بالكلاثرين (CCVs) إدخال المواد من سطح الخلية بالإضافة إلى حركة الحمولة في مسارات النقل بعد جولجي. توفر هذه التنوع في الوظائف جزئياً بواسطة مجمعات معقدات موصل كلاثرين أحادية ومتعددة توفر انتقائية للمكونات والحمولة. يعمل مجمع بروتين التجميع بروتين-1 (AP-1) كجزء من المسار الإفرازي في شبكة نقل ما بعد جولجي (TGN)، بينما يعمل مجمع AP-2 ومجمع TPLATE معاً عند الغشاء البلازمي لتنفيذ البلعمة المعتمدة على الكلاثرين. سيكون تحديد وتوصيف شامل لشبكة الآلات الأساسية والملحقة المحفوظة تطورياً وخاصة بالنباتات المشاركة في تكوين واستهداف CCVs مفتاحاً لفهمنا الإضافي لنقل المواد المعتمد على الكلاثرين في النباتات. لتسهيل هذه الدراسات، قمنا بتحليل البروتينوم للحويصلات المغلفة بالكلاثرين المستخلصة من خلايا أرابيدوبسيس (Arabidopsis thaliana) المعزولة من زراعة معلقة في مراحل الانقسام والتوسع. تم التحقق من نتائج تحليل مطياف الكتلة المتردد عبر تجارب وسم كيميائي مختلف لتحديد البروتينات المشتركة مع CCVs. تضمنت البروتينات المثرية في CCVs مكونات ومواد شحميات عرفها سابقاً مثل مستقبلات الفرز الفجوية بالإضافة إلى مكونات محفوظة وخاصة بالنباتات لم يتم تعريف وظيفتها في النقل المعتمد على الكلاثرين سابقاً. من الملحوظ، بالإضافة إلى AP-1 وAP-2، تم العثور على جميع وحدات مجمع AP-4 بكثرة في بروتينوم CCV، ولكن ليس AP-3 أو AP-5. يتم دعم ارتباط AP-4 بالحويصلات المغلفة بالكلاثرين من أرابيدوبسيس من خلال بيانات كيميائية حيوية إضافية.