يمكن أن تثبط Schizandrin A انتشار خلايا سرطان الرئة غير صغير الخلايا من خلال تحفيز توقف دورة الخلية، apoptosis وautophagy

يمكن استخراج Schizandrin A (SchA) من نبات الكرمة Schisandra chinensis وقد أُبلغ عن منحها خصائص بيولوجية نشطة مختلفة. ومع ذلك، لا تزال تأثيراتها البيولوجية المحتملة على سرطان الرئة غير صغير الخلايا (NSCLC) غير معروفة. لذلك، تهدف الدراسة الحالية إلى معالجة هذه القضية. تم أولاً معالجة خطوط خلايا NSCLC وخلايا الظهارة الرئوية الطبيعية بـ SchA. تم قياس حيوية الخلايا والتكاثر باستخدام اختبار CellTiter-Glo واختبارات تشكيل المستعمرات، على التوالي. تم استخدام صبغة PI لقياس توزيع دورة الخلية. تم الكشف عن البروتينات المتعلقة بدورة الخلية p53 و p21 و cyclin D1 و CDK4 و CDK6 و cyclin E1 و cyclin E2 و CDK2 وبروتين SOX4 المتعلق بأضرار DNA من خلال تحليل Western blot. تم استخدام صبغ Annexin V-FITC/PI وelectrophoresis DNA وصبغ Hoechst 33342/PI للكشف عن apoptosis. تم استخدام أصباغ الفلورسنت JC-1 و DCFH-DA لقياس جهد غشاء الميتوكوندريا وتركيزات الجذور الحرة على التوالي. تم قياس البروتينات المتعلقة بـ apoptosis caspase-3 و caspase-3 المنقسمة وpoly(ADP-ribose) polymerase (PARP) وPARP المنقسمة وBimEL وBimL وBimS وBcl2 وBax وcaspase-9 وcaspas-9 المنقسمة من خلال تحليل Western blot. تم استخدام Dansylcadaverine للكشف عن وجود الحويصلات الحامضية الليزوسومية. تم قياس مستويات التعبير للبروتينات المتعلقة بالautophagy LC3-I/II وp62/SQSTM وتنشيط AMPKα باستخدام تحليل Western blot. بالإضافة إلى ذلك، تم استخدام مثبط autophagy 3-methyladenine لتثبيط autophagy. لوحظ أن معالجة SchA تقلل من حيوية خلايا NSCLC بينما تثبط تكاثر الخلايا. أدت التركيزات المنخفضة من SchA (10-20 µM) بشكل رئيسي إلى تحفيز توقف دورة الخلية في مرحلة G1/S. بالمقابل، مع زيادة تركيز SchA المستخدم (20-50 µM)، مرت الخلايا بعملية apoptosis وتوقف دورة الخلية في المرحلة G2/M. مع زيادة تركيز معالجة SchA من 0 إلى 50 µM، زاد أيضًا تعبير بروتين p53 وSOX4 بشكل متزامن، لكن تعبير بروتين p21 ارتفع بواسطة 10 µM SchA وانخفض بواسطة تركيزات أعلى (20-50 µM). بالإضافة إلى ذلك، زادت مستويات التعبير للبروتينات Bcl-like 11 (Bim)EL وBimL وBimS بعد تطبيق SchA. تسبب SchA في تراكم الحويصلات الحامضية وزيادة ملحوظة في تعبير بروتين LC3-II، مما يشير إلى أن SchA نشطت مسار autophagy. ومع ذلك، وُجد أن تعبير بروتين p62 قد ازداد بواسطة SchA، مما يشير إلى أن p62 لم يتم تكسيره خلال تدفق autophagic. لم يكن لمثبط 3-methyladenine أي تأثيرات ملحوظة على apoptosis المحفز بواسطة SchA. جمع النتائج من الدراسة الحالية تشير إلى أن SchA exerted تأثيرات مثبطة على فيزيولوجيا NSCLC من خلال تحفيز توقف دورة الخلية وapoptosis. بالإضافة إلى ذلك، ألهم SchA جزئيًا autophagy، التي لم تؤد إلى أي تأثيرات وقائية على الخلايا.