الترجمة في المختبر للإطار المفتوح القابل للقراءة upstream في الرنا المرسال الذي يشفر إنزيم S-أدينوزيلميثيونين ديكاربوكسيلاز

الإطار المفتوح القابل للقراءة upstream (uORF) في الرنا المرسال الذي يشفر إنزيم S-أدينوزيلميثيونين ديكاربوكسيلاز هو عنصر يستجيب للبوليامين ويكبح ترجمة الجين المرتبط downstream في الجسم الحي. في هذه الورقة، نقدم الدليل المباشر الأول على تخليق الببتيدات من uORF لـ S-أدينوزيلميثيونين ديكاربوكسيلاز باستخدام نظام ترجمة في المختبر. نفحص تأثير تركيز الكاتيونات على تخليق الببتيدات وتأثير تغيير تسلسل uORF على تخليق الببتيدات. كان تخليق الببتيدات البريّة والمتغيرة مشابهًا عند جميع تركيزات المغنيسيوم التي تم اختبارها. على النقيض، كان تخليق الببتيد البري أكثر حساسية من تخليق الببتيدات المتغيرة لتركيزات مرتفعة من البوليامينات الطبيعية، مثل سبيرمدين وسبيرمين، بالإضافة إلى عدة نظائر للبوليامين. تأثرت حساسية التخليق في المختبر تجاه سبيرمدين بتسلسل الأحماض الأمينية وطول منتج الببتيد من uORF. تتماشى النتائج في هذه الدراسة مع تأثيرات uORF والبوليامينات على ترجمة الجين downstream في الجسم الحي وتدعم الفرضية القائلة بأن البوليامينات وبنية الببتيد الناتج تخلق مرحلة تحد من المعدل في ترجمة uORF، ربما من خلال آلية توقف الريبوسوم.