Key points are not available for this paper at this time.
تم التعبير عن تسلسلات الحمض النووي الكاملة التي تشفر مؤشر أحادي السكر / H+ STP1 من أرابيدوبسيس ثالانا أو بروتين STP1-His6 المسمى بالهيستيدين في خميرة الخبز Saccharomyces cerevisiae. تم العثور على كل من STP1 البري والبروتين المعدل بالهيستيدين في أغشية البلازما لخلايا الخميرة المحولة. لم تسبب التعديلات في الطرف C فقدان نشاط النقل مقارنة بالبروتين البري. تم استخدام أجسام مضادة مضادة لـ STP1 لتأكيد هوية البروتين في الخميرة وللمقارنة بين الأوزان الجزيئية الظاهرة لبروتينات STP1 في مستخلصات الأغشية من الخميرة أو أرابيدوبسيس ثالانا. تم دمج أغشية البلازما النقية من الخميرة مع بروتينات دهنية تتكون من دهون Escherichia coli وأكسيد السيانيم المأخوذ من قلب البقر. تسبب إضافة الأسكوربات / TMPD / السيانيم إلى هذه الحويصلات الموحدة في تشكيل فوري لجهد الأغشية (داخل سالب؛ تم مراقبته باستخدام كاتيونات 3H-tetraphenylphosphonium) وتدفق متزامن، حساس لفك الارتباط، لـ D-غلوكوز إلى الحويصلات المحفزة. يعتبر بروتين STP1-His6 نشطًا وظيفيًا بعد التحليل باستخدام أوكتيل-بيتا-D-غلوكوزيد، كما تم إظهاره من خلال إدخال البروتين في بروتينات دهنية بواسطة تخفيف المنظف وتحديد سعة النقل الناتجة. تم استخدام مستخلصات المنظفات من إجمالي الأغشية أو أغشية البلازما من خلايا الخميرة المتحولة لتطهير بروتين STP1-His6 بشكل منفرد على أعمدة Ni(2+)-NTA. تم التحقق من هوية البروتين المنقى باستخدام التحليل المناعي والتسلسل من الطرف N.
درس ستولز وآخرون (مون,) هذا السؤال.