Key points are not available for this paper at this time.
تعتبر صعوبة معترف بها على نطاق واسع في الطرق الحالية المستخدمة لاستنساخ cDNA هي الحصول على قطع cDNA تحتوي على التسلسل النووي الكامل لـ mRNA المقابل. تخفف إجراءات الاستنساخ الموضحة هنا من هذه المشكلة. من بين 10(5) من المتغيرات المستنسخة من البلازميد-cDNA التي تم الحصول عليها لكل ميكروغرام من mRNA الدجاج، كان حوالي 10% يحتوي على تسلسل كامل من alpha- أو beta-globin mRNA، وما لا يقل عن 30 إلى 50%، ولكن من المرجح أكثر، يحتوي على جميع مناطق الترميز للبروتين. نحن نعزو الكفاءة العالية لاستنساخ cDNA بطول كامل أو تقريبًا بطول كامل إلى (i) حقيقة أن البلازميد DNA نفسه يعمل كمقدمة لتخليق cDNA من الشريحتين الأولى والثانية، (ii) انعدام أي معالجة إنزيم نووي للمنتجات، و(iii) حقيقة أن إحدى خطوات الإجراء تؤدي إلى استنساخ تفضيلي للمتغيرات المستنسخة مع cDNA بطول كامل على تلك مع cDNA مقطوع.
درس أوكاياما وآخرون (مون) هذا السؤال.