البوليببتيد بوزن 110 كيلو دالتون من بوليميراز RNA المعتمد على DNA البلاستيدات الخضراء في السبانخ: هل هو إنزيم ذو وحدة واحدة أم قلب حفاز لمجمعات إنزيمية متعددة الوحدات؟

تحتوي تحضيرات بوليميراز RNA المنقيّة بشكل كبير من البلاستيدات الخضراء للسبانخ على سبعة بوليببتيدات رئيسية بوزن 150، 145، 110، 102، 80، 75، و38 كيلو دالتون. أجد أن نشاط بوليميراز RNA يمكن فصله تحت ظروف محددة إلى ثلاث كسورات مختلفة بواسطة كروماتوغرافيا الهيبارين-سيغالوز. لقد أظهرت التحليلات المناعية أن الكسرة الأولى تحتوي على نشاط بوليميراز RNA المرتبط بجميع البوليببتيدات الرئيسية السبعة، وأظهرت دراسات أخرى أن بعض هذه البوليببتيدات (150، 145، 80، و38 كيلو دالتون) مرتبطة ببوليميراز RNA مشابه للإنزيم الموجود في الإشريكية القولونية. ومع ذلك، تظهر التحليلات المماثلة للكسورات المتبقية نشاطًا مرتبطًا فقط بالبوليببتيد بوزن 110 كيلو دالتون، مما يشير إلى وجود نوع ثانٍ من بوليميراز RNA البلاستيد. عينات من هذا البوليببتيد بوزن 110 كيلو دالتون المنقى بواسطة SDS/PAGE تقوم بتركيب RNA بنشاط في تفاعل يعتمد على قالب DNA سوبر لولبي وأربعة من ريبونوكليوزيد ثلاثي الفوسفات. لذلك، فإن هذا البوليببتيد يمتلك جميع الخصائص المتوقعة لبوليميراز RNA ذو وحدة واحدة من نوع بكتريوفاج T7.