Rompiendo Barreras: Un Método Confiable para la Extracción de ARN en la Investigación de Enfermedades Neurodegenerativas en Peces Cebra

El pez cebra (Danio rerio) es un vertebrado con características únicas, lo que lo convierte en un excelente modelo animal para la investigación biomédica. Un área de investigación implica investigar los cambios en la expresión génica durante los procesos neurodegenerativos, los cambios relacionados con la edad y los estudios de comportamiento en el pez cebra. Para lograr esto, se debe extraer ARN de alta calidad y cantidad del pez cebra. Este estudio tiene como objetivo desarrollar un método optimizado de extracción de ARN de los cerebros de las larvas de pez cebra. Después de criar y mantener el pez cebra en condiciones adecuadas, se separaron las larvas y se extrajeron sus cerebros. Utilizando un método optimizado basado en TRIzol, se extrajo ARN de los cerebros de las larvas de pez cebra. Para comparar, también empleamos kits comerciales y Trizol para la extracción de ARN. La cantidad y calidad del ARN extraído se midieron utilizando NanoDrop, electroforesis en gel y PCR en tiempo real. Seleccionamos cinco genes: gapdh y beta-actina como genes de referencia y otros tres genes expresados en el cerebro y sistema nervioso (bdnf, chd8, y lrp6). Según los resultados de NanoDrop, todas las muestras fueron purificadas con contaminación mínima de proteínas y polisacáridos, y la relación 260/280 y la relación 260/230 se encontraban dentro del rango estándar de 1.9-2.2. La cantidad de ARN extraído aumentó significativamente en comparación con otros métodos (valor P < 0.0001), y todos los genes estudiados presentaron alta expresión. La extracción de ARN demostró alta calidad y cantidad. En resumen, hemos desarrollado un método optimizado para la extracción de ARN de los cerebros de las larvas de pez cebra.