Impacto preanalítico del llenado incompleto de tubos de sangre K2EDTA en pruebas de biología molecular

Antecedentes y objetivos: El objetivo de este estudio fue investigar el posible efecto preanalítico del llenado incompleto de tubos de sangre en ensayos de biología molecular. Materiales y métodos: La población del estudio consistió en 13 voluntarios sanos de los cuales se recolectaron 11 mL de sangre completa y luego se distribuyeron en diferentes volúmenes (1.5, 3.0 y 6.0 mL, respectivamente) en tres tubos de sangre K2EDTA de 6.0 mL en spray seco y evacuados. Se realizó la extracción automatizada de ARN utilizando el kit de sangre Maxwell® CSC RNA. El ADN se extrajo con un MagCorePlusII, con la medición concomitante de la expresión del gen de gliceraldehído-3-fosfato deshidrogenasa (GAPDH). La concentración de ácidos nucleicos se calculó utilizando el espectrofotómetro NanoDrop 1000, y la pureza se evaluó mediante las relaciones de absorbancia A260/280 y A260/230. Resultados: La concentración de ARN fue mayor en los tubos llenos con 1.5 y 3.0 mL de sangre que en el tubo de referencia lleno de 6 mL. Las relaciones de ARN 260/280 y ARN 260/230 no difirieron significativamente entre los tubos de sangre llenos de manera diferente. La concentración de ADN se mantuvo constante en los tubos llenos de manera diferente. En comparación con el tubo de referencia lleno de 6.0 mL, los tubos de sangre llenos de 1.5 mL y 3.0 mL mostraron una menor relación de ADN 260/280 nm. La relación de ADN 260/230 no difirió significativamente en ninguno de los tubos llenos de diversas maneras. En comparación con el tubo de sangre de referencia lleno de 6.0 mL, los tubos de sangre llenos de 1.5 mL y 3.0 mL mostraron un aumento significativo en el umbral de ciclo de GAPDH. Conclusiones: Nuestros resultados sugieren que el llenado insuficiente de los tubos de sangre K2EDTA puede ser una fuente de sesgo modesta pero analíticamente significativa en las pruebas de biología molecular.