Cristales de proteína mecanorresponsive para el reciclaje de NADH en reacciones enzimáticas de múltiples ciclos

Las enzimas dependientes de NAD(H) desempeñan un papel crucial en la biosíntesis de fármacos y productos químicos finos, pero la limitación en la reciclabilidad del cofactor NAD(H) obstaculiza su aplicación más general. Aquí, reportamos la generación de cristales de proteína Cry3Aa modificados con PEI, mecanorrespondientes, y su uso para el reciclaje de NADH durante múltiples ciclos de reacción. Para demostrar su utilidad práctica, se ha producido una partícula de proteína Cry3Aa complementaria que contiene deshidrogenasa de formiato codificada genéticamente y co-inmovilizada para la regeneración de NADH y deshidrogenasa de leucina para catalizar la biosíntesis de l-tert-leucina (l-tert-Leu) dependiente de NADH. Cuando se combina con el cristal de Cry3Aa modificado con PEI, el sistema de reacción resultante podría usarse para la biosíntesis eficiente de l-tert-Leu durante hasta 21 días con una mejora de 10.5 veces en el número de recambio de NADH.