Plataforma de microarray de gota colgante reconfigurable para preparación y análisis bajo demanda de arreglos esferoides

En respuesta a la creciente demanda de investigación sobre cáncer basado en esferoides, se enfatiza la importancia de desarrollar plataformas integradas que puedan facilitar simultáneamente la producción de esferoides de alto rendimiento y el análisis multiplexado. Además, la comprensión de cómo el tamaño y la composición celular de los tumores influyen directamente en sus estructuras internas y funcionalidades subraya la necesidad crítica de producir esferoides de diversos tamaños y composiciones a gran escala. Para abordar esta creciente demanda, este trabajo presenta un kit de cultivo celular tridimensional (3D) in vitro configurable y vinculable (CLiCK) para esferoides, denominado CLiCK-Spheroid. Esta plataforma consta de tres componentes principales: un microarray de gota colgante (HDMA), un microarray de pilares cóncavos (CPMA) y bloques de gradiente. El HDMA por sí solo produce un arreglo de esferoides homogéneo, mientras que su combinación con el bloque de gradiente permite la generación de un arreglo de esferoides en gradiente de tamaño en un solo paso. Usando los arreglos de esferoides en gradiente de tamaño, se demuestra la ocurrencia de núcleos necróticos basados en el tamaño del esferoide. Además, los esferoides en un solo lote pueden ser convenientemente compartimentalizados y reorganizados usando un CPMA, mejorando la versatilidad de los arreglos de esferoides y permitiendo tratamientos de medicamentos multiplexados. Al combinar los diferentes métodos de ensamblaje, este trabajo ha logrado la producción de alto rendimiento de arreglos de esferoides en gradiente de composición celular, con variaciones notables en morfología y vascularización basadas en las composiciones celulares.