OMIP‐104: Un panel de citometría de flujo espectral de 30 colores para el análisis integral de la composición de células inmunitarias y subconjuntos de macrófagos en órganos metabólicos de ratón

Resumen La inflamación crónica de bajo grado inducida por la obesidad, también conocida como metaflamación, resulta de alteraciones de la respuesta inmunitaria en órganos metabólicos y contribuye al desarrollo de enfermedades hepáticas grasas y diabetes tipo 2. La diversidad de leucocitos residentes en los tejidos involucrados en estas disfunciones metabólicas justifica un inmunofenotipado en profundidad con el fin de esclarecer la etiología de la enfermedad. Aquí, presentamos un panel de citometría de flujo de 30 colores y espectro completo, diseñado para (i) identificar los principales subconjuntos de células inmunitarias innatas y adaptativas en el hígado y los tejidos adiposos blancos de ratones y (ii) discriminar varios subconjuntos mieloides específicos de tejidos conocidos por contribuir al desarrollo de disfunciones metabólicas. Este panel, notablemente, permite distinguir las células de Kupffer residentes en el hígado derivadas de embriones de los macrófagos derivados de monocitos recién reclutados y KCs. Además, varios subconjuntos de macrófagos de tejido adiposo (ATM), incluidos los macrófagos perivasculares, macrófagos asociados a lípidos y los ATMs pro-inflamatorios CD11c +, también pueden ser identificados. Finalmente, el panel incluye marcadores de superficie celular que han sido asociados con la activación metabólica de diferentes subconjuntos de macrófagos y células dendríticas. En conjunto, nuestro panel de citometría de flujo espectral permite un inmunofenotipado extenso de tejidos metabólicos murinos, con un enfoque particular en los subconjuntos de células mieloides relevantes para el metabolismo, y puede ajustarse fácilmente para incluir varios nuevos marcadores si es necesario.