Un ensayo de neutralización basado en pseudovirus para variantes de SARS-CoV-2: un ensayo rápido, rentable y de alto rendimiento basado en BSL-2 útil para la evaluación de la inmunogenicidad de la vacuna

Las respuestas de anticuerpos neutralizantes de las vacunas contra la COVID-19 son fundamentales para conferir protección contra el coronavirus 2 del síndrome respiratorio agudo severo (SARS-CoV-2). Se necesitan vacunas y ensayos efectivos de COVID-19 que midan anticuerpos neutralizantes contra variantes emergentes (es decir, XBB.1.5, XBB.1.16 y XBB.2.3). El uso de laboratorios de nivel de biosafety (BSL)-3 para ensayos con virus vivos resulta en costos más altos y un tiempo de respuesta más largo; por lo tanto, se desarrolló un ensayo de neutralización de pseudovirus (PNT) basado en BSL-2. Los pseudovirus se produjeron mediante la cotransfección de células con plásmidos que codifican un andamiaje lentiviral que expresa un reportero de luciferasa; proteínas no superficiales para la producción lentiviral; y proteínas de espiga (S) ancestrales u Ómicron (BA.1 y BA.5) de SARS-CoV-2. El PNT se desarrolló y optimizó en experimentos de dosis y cinética. Las muestras de suero representativas (participantes convalecientes de COVID-19 o vacunados con NVX-CoV2373 inscritos en el ensayo 2019nCoV-101) mostraron un amplio rango dinámico. Los datos de neutralización mostraron una correlación robusta con niveles validados de IgG anti-espiga recombinante y títulos de inhibición de la enzima convertidora de angiotensina 2 (ancestrales). Este ensayo es adecuado para medir la capacidad de neutralización en muestras clínicas de individuos infectados con SARS-CoV-2 o inmunizados con una vacuna contra la COVID-19. Los resultados sugieren que este PNT proporciona una alternativa de menor costo, de alto rendimiento y de rápida respuesta a los ensayos de microneutralización basados en BSL-3 y permite el descubrimiento y desarrollo de vacunas efectivas contra variantes emergentes.