Protocolos para Ensayos Fenotípicos de Co-Cultivo con Células de Cáncer de Mama y Macrófagos Derivados de THP-1

Resumen La masa tumoral no solo está compuesta por células cancerosas, sino también por poblaciones heterogéneas de células inmunitarias y estromales, junto con los componentes de la matriz extracelular, que se denominan colectivamente microambiente tumoral (TME). Esta población diversa de células puede comunicarse entre sí, lo que puede afectar positiva o negativamente el crecimiento tumoral y la progresión hacia la malignidad. El tipo más común de células inmunitarias en el TME son los macrófagos. Los macrófagos se diferencian continuamente en un amplio espectro de macrófagos asociados a tumores (TAMs) en respuesta a numerosas señales del TME, lo que hace que los estudios sobre TAMs sean bastante desafiantes. Por lo tanto, implementar protocolos confiables es un hito para sacar conclusiones consistentes sobre las interacciones entre células cancerosas y TAMs. Aquí, proporcionamos los detalles para la polarización de una línea celular monocítica de leucemia humana, THP-1, en macrófagos M0, M1 y M2. También presentamos un protocolo paso a paso para un co-cultivo en transwell utilizando una línea celular de cáncer de mama humano, HCC1806, y macrófagos derivados de THP-1. Finalmente, describimos los ensayos de formación de colonias y migración realizados en las células de cáncer de mama después del co-cultivo con macrófagos para medir la influencia de los macrófagos en las características oncogénicas de las células cancerosas. En resumen, nuestros protocolos basados en co-cultivo pueden ser un recurso valioso para investigar las interacciones entre macrófagos y células cancerosas.