Las CueOs son oxidasas multicobre (MCOs) involucradas en procesos biológicos clave relacionados con la homeostasis del cobre. Su función fisiológica es la oxidación catalítica de iones cúpricos tóxicos (Cu+) a iones cúpricos (Cu2+), acoplada con la reducción de O2 a agua. Además de los sitios de cobre que pertenecen a la cadena clásica de transferencia de electrones de las MCOs, desde Cu-T1 hasta el clúster trinuclear (TNC), se identificó previamente un sitio Cu8 en las estructuras cristalinas de EcCueO, ubicado en estrecha proximidad al TNC. Un ligando conservado del sitio Cu8 es el aminoácido H145, en ambos estados redox Cu+ y Cu2+. Al diseñar y caracterizar la variante H145S, este trabajo demuestra por primera vez el papel fundamental de H145 en la maduración funcional/metalación de los sitios activos de EcCueO bajo condiciones de baja disponibilidad de Cu2+/Cu+. Además, mostramos que H145 es parte de un motivo HxHxH conservado en las CueOs, y más generalmente en las MCOs bacterianas, sugiriendo un sitio de unión al cobre Cu8 común para la metalación en vivo. La ausencia de este motivo conservado en ciertas MCOs, o la presencia de inserciones adicionales ricas en His/Met o ricas en His, parece estar relacionada con la disponibilidad celular de cobre y destaca la adaptabilidad de las MCOs. Más allá de esta comprensión fundamental del mecanismo de metalación de las MCOs, este trabajo allana el camino para aplicaciones en medicina y detección ambiental de cobre.
Santucci et al. (Thu,) estudiaron esta cuestión.