El virus Zika (ZIKV), un flavivirus único con potencial neurotrópico y teratogénico, puede cruzar la barrera hematoencefálica y persistir en las células endoteliales microvasculares cerebrales (BMEC); sin embargo, no existen vacunas aprobadas ni antivirales específicos, y sus mecanismos de cruce de barrera y neuroinvasión siguen siendo elusivos. Estrategias innovadoras para identificar factores adicionales del huésped que median la infección por ZIKV podrían proporcionar información clave y ayudar a abordar estos desafíos. Para descubrir nuevos factores del huésped, establecimos la primera biblioteca de knockout CRISPR/Cas9 de genoma completo en la musaraña arborícola (Tupaia belangeri) y realizamos un screen en las BMEC, identificando la proteína de dedo anular 6 (RNF6) como un nuevo factor proviral para ZIKV. La infección por ZIKV en BMEC se redujo significativamente tras el knockout o knockdown de RNF6, pero se potenció con la sobreexpresión o rescatado de RNF6. Mecanísticamente, RNF6 interactúa con la proteína NS5 del ZIKV y actúa como un posible regulador negativo de las vías de señalización de interferón tipo I y MAPK. Los análisis evolutivos y estructurales revelaron que RNF6 está altamente conservado entre humanos y musarañas arborícolas; el acoplamiento molecular identificó además residuos de unión NS5 compartidos (Gln-59, Arg-140), apoyando el papel proviral conservado de RNF6 humano en la infección por ZIKV. Nuestros hallazgos destacan la pantalla GeCKO de musarañas arborícolas como un enfoque eficiente para identificar nuevos factores del huésped y establecen RNF6 como un factor proviral crítico para la replicación de ZIKV en BMEC, proporcionando nuevas perspectivas sobre la patogénesis neurotrófica del ZIKV e informando estrategias antivirales potenciales.
Qi et al. (Jue,) estudiaron esta cuestión.