Descubrimiento de Inhibidores de CBL-B que Potencian la Activación de Células T y la Supresión Tumoral

Resumen Antecedentes. CBL-B, una ligasa E3 de ubiquitina tipo RING, es un regulador maestro de la activación periférica de células T y un objetivo prometedor en inmuno-oncología (IO). La eliminación genética de CBL-B en ratones conduce a una activación potenciada de células T y al rechazo tumoral espontáneo, sugiriendo que la inhibición farmacológica de CBL-B podría revertir la inmunosupresión en el microambiente tumoral y potenciar la inmunidad antitumoral. Este trabajo describe el descubrimiento racional de inhibidores tipo cola intramolecular dirigidos a la conformación autoinhibida de CBL-B. Métodos. Diseñamos y ejecutamos una campaña de cribado de alto rendimiento (HTS) usando un ensayo de fluorescencia homogénea con tiempo resuelto (HTRF) para identificar inhibidores de pequeñas moléculas que estabilizan la conformación cerrada y autoinhibida de CBL-B. Los resultados fueron validados mediante ensayos ortogonales HTRF y resonancia de plasmones superficiales (SPR). El modo de unión se elucidó mediante estructura cristalina por rayos X de co-cristalización. La serie fue optimizada en afinidad y propiedades a través de ciclos iterativos de química medicinal. Los compuestos líderes fueron evaluados en su capacidad para potenciar la activación de células T y la secreción de citoquinas en células T humanas primarias, así como su eficacia antitumoral en un modelo murino sinérgico. Resultados. El HTS de 250,000 compuestos produjo un único compuesto inhibidor con KD=24.12 ± 8.90 μM para la activación de CBL-B. La optimización guiada por estructura condujo a NRX-8766, con un KD de 0.033 ± 0.001 μM para CBL-B. El tratamiento de células mononucleares periféricas humanas (hPBMCs) con NRX-8766 resultó en aumentos de 3 a 4 veces en marcadores de activación de células T (CD25, CD69) y de 2 a 25 veces en la secreción de citoquinas (IL-2, IFN-γ, TNF-α) cuando se estimularon con α-CD3 o α-CD33/α-CD28. En vivo, la administración oral de NRX-8766 a ratones con tumores sinérgicos CT26 incrementó significativamente la activación de células T y suprimió el crecimiento tumoral. Conclusiones. Estos estudios demuestran que la inhibición farmacológica de CBL-B reproduce el fenotipo reportado en ratones con deleción genética. NX-1607, un inhibidor de CBL-B de primera clase, está actualmente en desarrollo clínico como una potencial inmunoterapia contra el cáncer. Formato de cita: Stefan Gajewski, Asad Taherbhoy, Brandon Bravo, Ketki Dhamnaskar, Julie Sheung, Dhwani Haria, Austin Tenn-McClellan, Jennifa Gosling, Matthew C. Clifton, Mario Cardozo, Paul A. Barsanti, Jilliane R. Perkins, Kathleen Boyle, Thomas Cummins, Morgan Lawrenz, Marilena Gallotta, Jeffrey T. Mihalic, Nichole O'Connell, Sumit Prakash, Anjanabha Saha, Ryan Rountree, Chenbo Wang, Dahlia R. Weiss, Christoph W. Zapf, Frederick Cohen, . Descubrimiento y caracterización de inhibidores tipo cola intramolecular de CBL-B que incrementan la activación de células T y suprimen el crecimiento tumoral resumen. En: Actas de la Reunión Anual de la American Association for Cancer Research 2026; Parte 1 (Resúmenes Regulares); 17-22 abril 2026; San Diego, CA. Philadelphia (PA): AACR; Cancer Res 2026;86(7 Suppl):Resumen nº 6733.