Una estrategia de detección ratiométrica tridimensional basada en la fluorescencia unimolecular y la fluorescencia retardada activada térmicamente.

La detección visualizada a través de señales de fluorescencia es un método poderoso para la detección química y física. Sin embargo, la utilización de sondas moleculares fluorescentes aún sufre de la falta de calibración precisa de señales en uso práctico. Aquí mostramos que la fluorescencia y la fluorescencia retardada activada térmicamente pueden producirse simultáneamente a nivel de una sola molécula. La fluorescencia retardada activada térmicamente sirve como señal de detección, con su longitud de onda y tiempo de vida alterados en correlación con la polaridad, mientras que la fluorescencia permanece invariable como referencia interna. Al establecer una curva de trabajo tridimensional en función de la longitud de onda ratiométrica y el tiempo de vida fotoluminiscente frente a la polaridad, los factores de perturbación durante un proceso de detección relevante pueden minimizarse en gran medida mediante esta auto-calibración múltiple. Esta estrategia se aplicó además en una detección precisa de la variación de polaridad microambiental en sistemas de fosfolípidos complejos, proporcionando nuevos conocimientos para un diagnóstico conveniente y preciso de lesiones en la membrana.