Papel del Hub de la β-Appendage de AP2 en el Reclutamiento de Socios para la Ensamblaje de Vesículas Recubiertas de Clatrina

Los dominios de la proteína adaptadora compleja 2 alfa y beta-appendage actúan como centros para el ensamblaje de redes de proteínas accesorias involucradas en la formación de vesículas recubiertas de clatrina. Identificamos un amplio repertorio de interacciones de beta-appendage mediante espectrometría de masas. Estas interactúan con dos sitios de interacción de ligandos distintos en la beta-appendage (los sitios "superior" y "lateral") que se vinculan a motivos distintos de los anteriormente identificados en la alfa-appendage. Resolucionamos la estructura de la beta-appendage con un péptido de la proteína accesoria Eps15 unido al sitio lateral y con un péptido del adaptador de carga accesoria beta-arrestina unido al sitio superior. Demostramos que las proteínas accesorias pueden unirse simultáneamente a múltiples appendages, lo que permite que estas cooperen en la mejora de las avidez de los ligandos que parecen ser irreversibles in vitro. Ahora proponemos que la clatrina, que interactúa con la beta-appendage, logra el desplazamiento de ligandos in vivo mediante auto-polimerización a medida que el surco recubierto madura. Esto cambia el entorno de interacción de interacciones impulsadas por afinidad en fase líquida, a interacciones impulsadas por estabilidad en fase sólida ("matricidad"). Las proteínas accesorias que interactúan únicamente con los appendages se desplazan a áreas del surco recubierto donde la clatrina aún no se ha polimerizado. Sin embargo, proteínas como la beta-arrestina (arrestina no visual) y la proteína de hipercolesterolemia autosómica recesiva, que tienen interacciones directas con la clatrina, permanecerán en los surcos recubiertos con sus receptores interactuantes.